L'uso di tecnologie cellulari per migliorare l'aspetto delle cicatrici

La scienza moderna è caratterizzata dal rapido sviluppo di una serie di discipline correlate, riunite sotto il nome comune di "biotecnologia". Questo ramo della scienza, sulla base dei più recenti risultati nel campo della biologia, citologia, genetica molecolare, ingegneria genetica, transplantantologii, mira a sfruttare l'enorme potenziale delle cellule vegetali e animali - l'unità strutturale di base di tutti gli esseri viventi. "Vivere cellula è pronta reattore biotecnologica in cui sono implementati non solo i processi che portano alla formazione del prodotto finale, ma anche una serie di altri sistemi di facilitare il mantenimento di attività catalitica ad alto livello" - John Woodward, 1992. Scienza Avvio della cella è stato messo in 1665, quando il fisico inglese R. Hooke creò il primo microscopio e nella spina trovò cellule - cellulae ("cellule"). Nel 1829, M. Schleiden e T. Schwann sostennero la "teoria cellulare", che dimostrò che tutti gli esseri viventi sono costituiti da cellule. R. Virkhov nel 1858 ha provato, che in una base di tutte le malattie la violazione dell'organizzazione strutturale e un metabolismo di gabbie risiede. Divenne il fondatore della "patologia cellulare". Il contributo fondamentale alla scienza della cellula fu dato nel 1907-1911. R. Garrison e AA Maksimov, dimostrando la possibilità di coltivare cellule al di fuori del corpo. Il loro lavoro ha dimostrato che per la coltivazione di cellule, i tessuti animali e le parti delle piante dovrebbero essere scollegati meccanicamente in piccoli pezzi. Per isolare le cellule, i tessuti vengono tagliati con un coltello affilato o un microtomo a sezioni sottili, circa 0,5-1,0 mm. La divisione fisica delle cellule è chiamata immobilizzazione. Le cellule isolate sono ottenute per dispersione enzimatica di pezzi di piante o tessuti. Dopo la frantumazione con forbici affilate, i pezzi vengono trattati con tripsina o collagenasi per ottenere una sospensione - sospensione di singole cellule o dei loro microaggregati in un mezzo speciale. I gel di alginato (alginato di calcio) sono ampiamente usati per immobilizzare le cellule vegetali. È dimostrato che le cellule vegetali e animali immobilizzate mantengono la capacità di biosintesi. I prodotti della biosintesi cellulare si accumulano nelle cellule, la loro espressione avviene spontaneamente o con l'aiuto di sostanze speciali che promuovono l'aumentata permeabilità delle membrane cellulari.

La coltivazione di cellule animali è un processo molto più complicato rispetto alla coltivazione di cellule vegetali, che richiede attrezzature moderne speciali, alte tecnologie, la presenza di vari media, fattori di crescita progettati per preservare la vitalità delle cellule e mantenerle in uno stato di attività funzionale elevata. È stato scoperto che la maggior parte delle cellule di tessuti duri, come reni, fegato e tessuti cutanei sono dipendenti dalla superficie, quindi in vitro possono essere coltivate solo sotto forma di strati sottili o monostrati direttamente attaccati alla superficie del substrato. La longevità, la proliferazione e la stabilità funzionale delle cellule ottenute dalla dispersione del tessuto enzimatico dipendono in larga misura dal substrato su cui sono cresciuti. È noto che tutte le cellule ottenute da tessuti vertebrati hanno una carica superficiale negativa, quindi i substrati caricati positivamente sono adatti alla loro immobilizzazione. Le cellule isolate ottenute direttamente da tessuti interi possono essere mantenute nella coltura primaria in uno stato immobilizzato, pur mantenendo un'elevata specificità e sensibilità per 10-14 giorni. Le cellule immobilizzate e dipendenti dalla superficie svolgono oggi un ruolo importante nella biologia, in particolare il loro ruolo è importante per gli studi clinici. Sono utilizzati per studiare i cicli di sviluppo cellulare, la regolazione della loro crescita e differenziazione, le differenze funzionali e morfologiche tra cellule normali e tumorali. Monostrati di cellule immobilizzati sono utilizzati in biotest, per la determinazione quantitativa di sostanze biologicamente attive, nonché per studiare gli effetti di vari farmaci e tossine su di essi. Un grande interesse per la cellula, come dispositivo medico, è stato dimostrato da medici di tutte le specialità per diversi decenni. In questa direzione, le tecnologie cellulari si stanno rapidamente sviluppando.

Con l'inizio della terapia dei tessuti e delle cellule, il nome del famoso scienziato russo V.P. Filatov, che nel 1913 ha gettato le basi per l'insegnamento della terapia dei tessuti studiare trapianti di cornea di donatori sani di pazienti con cataratta .. Durante il funzionamento, un trapianto di cornea, ha trovato che le cornee conservate al freddo per 1-3 giorni ad una temperatura di -2 -4 gradi C diventa meglio di fresco. Così è stato trovato cella per assegnare proprietà in condizioni sfavorevoli alcune sostanze che stimolano i processi vitali nel tessuto trapiantato e tessuti rigenerativi nel destinatario. Il tessuto e le cellule separate dal corpo sono in uno stato di esperienza, cioè una vita rallentata. In essi, la circolazione sanguigna si arresta e, di conseguenza, la nutrizione. La respirazione tissutale è estremamente difficile, l'innervazione e il trofismo sono sconvolti. Essendo in un nuovo stato qualitativo, adattandosi alle nuove condizioni di esistenza della cellula, producono sostanze speciali che possiedono proprietà medicinali. Queste sostanze di natura non proteica sono state nominate da V.P. Filatov come stimolanti biogenici. Si V.V.Skorodinskoy impostato insieme al materiale da animali e piante possono essere liberamente su t autoclave a 120 ° C per un'ora dopo immagazzinamento in condizioni avverse, mentre non solo non hanno perso l'attività, ma al contrario rinforzato, grazie alla resa stimolanti biologici da tessuti in scatola. Inoltre, hanno perso proprietà antigeniche, riducendo significativamente la possibilità di rigetto. Il materiale sterile in scatola è stato iniettato nel corpo mediante impianto (reimpianto) sotto la pelle o sotto forma di iniezioni di estratti, ottenendo risultati adeguati. È stato anche scoperto che i tessuti fetali contengono molte più sostanze biologicamente attive rispetto ai tessuti adulti e alcuni fattori si trovano solo negli embrioni. Inoculati organismo ricevente tessuto fetale non percepito come estraneo alla assenza nella composizione delle proteine di membrana citoplasmatica competenti per la specie, il tessuto, e specificità individuale (proteine, complesso maggiore di istocompatibilità). Di conseguenza, l'inoculazione dei tessuti fetali umani nel corpo umano non innesca i meccanismi di difesa immunologica e la reazione di incompatibilità e rifiuto. VP Filatov nella pratica medica ampiamente usato la placenta umana e la pelle. I cicli di trattamento consistevano in 30-45 iniezioni di estratti tissutali e 1-2 impianti di tessuti autoclavati.

Avendo iniziato la ricerca con tessuti e cellule umane e animali, trasferì le sue generalizzazioni al mondo vegetale. La produzione di esperimenti sulle parti di piante vive (aloe, piantaggine, agave, erbette e erba di San Giovanni, ecc), lo creò a condizioni avverse, ponendo il taglio lascia in un luogo buio, come per la vita della pianta ha bisogno di luce. Dalla torba fangosa e dalla torba sono stati somministrati anche stimolatori biogenici, a causa del fatto che fango e torba si formano con la partecipazione di microflora e microfauna.

Un nuovo ciclo di terapia dei tessuti sviluppo ricevuto negli anni '70, quando le conoscenze e decenni di esperienza accumulata hanno permesso un livello completamente nuovo di utilizzare tessuti e cellule animali e vegetali per il trattamento umano e prolungare la longevità attiva. Quindi, in alcune cliniche locali e un certo numero di donne straniere in fisiologica della menopausa, menopausa o di sfondo ooforectomia per rallentare il processo di invecchiamento, lo sviluppo di aterosclerosi, osteoporosi, disfunzioni del sistema immunitario, endocrino e nervoso ha cominciato a tenere terapia dei tessuti nei tessuti fetali di placenta, l'ipotalamo, fegato, ovaie, timo e ghiandole tiroidee. In uno dei più prestigiosi di cliniche Gerontius-cosmetici in Europa occidentale per lo stesso scopo per decenni utilizzando estratti iniezioni, derivate da tessuti fetali di ghiandole sessuali di pecore.

Nel nostro paese, anche il trattamento biostimolante è stato ampiamente utilizzato. Pazienti con varie malattie fino iniezioni recentemente attivamente somministrati estratti di placenta, aloe, kolanhoe, stonecrops grandi frottole (BioSed), peloidodistillyat, peloidin, torfot, gumizol preparati dai procedura Filatov. Attualmente nelle farmacie è praticamente impossibile acquistare queste preparazioni di tessuti domestici altamente efficaci e poco costose di origine animale, vegetale e minerale.

Sottostante ottenere diverse preparazioni di nutrienti di tessuti e organi umani importati, come rumalon (da tessuto cartilagineo e midollo osseo) aktovegin (da sangue polpaccio) (bovini estratto sangue) solkoseril e droghe domestici - vitreo ( bovini vitreo dell'occhio) kerakol (dalla cornea di bovini), splenin (dalla milza di bovini), epitalyamin (da regione epitalyamo-epifisi), si trovano anche la ricerca Filatov. La proprietà comune a tutti i preparati tissutali è l'effetto complessivo sull'intero organismo. Così, la "terapia dei tessuti" Accademico Filatov è stata la base della maggior parte dei moderni sviluppi e le tendenze in chirurgia, l'immunologia, ostetricia e ginekoloii, gerontologia, combustiology, dermatologia e cellulare, nonché prodotti della sua biosintesi cosmetologia legate.

Il problema del trapianto di tessuti ha preoccupato l'umanità fin dai tempi antichi. Quindi nel papiro di Ebers, datato 8.000 aC, c'è già una menzione dell'uso del trapianto di tessuto per compensare i difetti nelle singole parti del corpo. Nel "Libro della vita" dello scienziato indiano Sushruta, che visse per 1.000 litri. BC c'è una descrizione dettagliata del restauro del naso dalla pelle delle guance e della fronte.

La necessità di pelle del donatore è cresciuta in proporzione all'aumento del numero di interventi di chirurgia plastica e ricostruttiva. A questo proposito, cominciò a usare la pelle cadaverica e fetale. C'era la necessità di conservare le risorse dei donatori e trovare modi per sostituire la pelle umana con i tessuti animali, varie opzioni di modellazione della pelle. Ed è proprio in questa zona scienziati che lavorano, quando nel 1941 P.Medovar prima ha mostrato la possibilità fondamentale della crescita dei cheratinociti in vitro. Il prossimo passo importante nello sviluppo della tecnologia cellulare era opera di Karasek M. E M. Charlton, che nel 1971 ha effettuato il primo trapianto riuscito di cheratinociti autologhi da una coltura primaria di ferite di coniglio, utilizzando come substrato per la coltivazione di gel di collagene KC, migliorando così la proliferazione cellulare nella cultura J.Rheinvvald. H Verde. Hanno sviluppato una tecnologia per la coltura seriale di grandi quantità di cheratinociti umani. Nel 1979, Green e collaboratori hanno scoperto le prospettive di applicazione medica di coltura cellulare dei cheratinociti nella ricostruzione della pelle con ustioni estese, dopo di che questa tecnica è in continuo miglioramento, ha cominciato a essere utilizzato dai chirurghi bruciare centri all'estero e nel nostro paese.

Nel processo di studio delle cellule viventi hanno rivelato che le cellule producono non solo stimolatori biogeni di origine non-proteine, ma anche una serie di citochine, neurotrasmettitori, fattori di crescita, polipeptidi, che svolgono un ruolo importante nella regolazione dell'omeostasi di tutto l'organismo. Si è constatato che, in varie cellule e tessuti, sono contenuti bioregolatori peptidici. Che hanno una vasta gamma di effetti biologici e coordinano lo sviluppo e il funzionamento dei sistemi multicellulari. Inizia l'era dell'applicazione della coltura cellulare come agente terapeutico. Nel nostro paese tansplantatsiyu sospensione dei fibroblasti e delle cellule cheratinociti strati laminati negli ultimi dieci anni abbiamo adottato in combustiology. Un tale interesse attivo nel trapianto di cellule cutanee bruciato a causa della necessità di una rapida chiusura di grandi superfici di masterizzazione e deficit pelle donatore. La possibilità di un piccolo pezzo di pelle grande distinguere cellule che può coprire la superficie della ferita nel 1000 e anche 10 000 volte superiore alla superficie cutanea donatore era molto attraente e importante per Combustiology e bruciano pazienti. La percentuale di attecchimento strati di cheratinociti varia a seconda della zona di combustione, l'età e lo stato di salute del paziente 71,5-93,6%. L'interesse per il trapianto di cheratinociti e fibroblasti associati non solo con la possibilità di chiudere rapidamente il difetto nella pelle, ma anche per il fatto che questi trapianti hanno potente potenziale bioattivi per migliorare l'aspetto dei tessuti derivati da trapianto. Tumori di vasi sanguigni, rimozione di ipossia, miglioramento del trofismo, accelerata maturazione del tessuto immaturo - tale base morfo-funzionale di questi cambiamenti positivi che avvengono a causa del rilascio delle cellule trapiantate, fattori di crescita e citochine. Pertanto, grazie alla introduzione nella pratica clinica di avanzate strati multicellulari tecnologie cellulare trapianto di cheratinociti e fibroblasti autologhi e allogenici su ampie superfici della ferita, Combustiology avuto la possibilità non solo di ridurre il tasso di mortalità di combustione con una grande percentuale di lesioni cutanee, ma anche per migliorare il tessuto cicatriziale qualità, che inevitabilmente si verifica sul sito di ustioni IIb e IIIa e 6 gradi. Combustiologists esperienza maturata nel trattamento delle superfici delle ferite nei pazienti ustionati hanno suggerito l'idea di utilizzare è già un metodo modificato di Green in dermatologia e pratica chirurgica in vari pelle e cosmetici pathology (trofiche ulcere, vitiligine, nevo, epidermolisi bollosa, rimozione tatuaggi, legate all'età cambiamenti della pelle, così come per migliorare l'aspetto delle cicatrici).

L'uso di cheratinociti allogenici in chirurgia, dermatologia e combustiology ha diversi vantaggi rispetto cheratinociti autologhi primeneiya come il materiale cellulare può essere preparato in anticipo in quantità illimitate, conservata e utilizzata quando necessario. È anche noto che i KC allogenici hanno una ridotta attività antigenica, poiché le cellule di Langerhans, portatrici di antigeni del complesso HLA, vengono perse in coltura in vitro. A favore dell'uso di KC allogenico, si dice anche che sono sostituiti da quelli autologhi dopo il trapianto, secondo i dati di diversi autori in termini di 10 giorni a 3 mesi. In connessione con questo, sono state create banche di cellule in molti paesi, grazie alle quali i trapianti di cellule possono essere prodotti nella giusta quantità e al momento giusto. Tali banche sono in Germania, negli Stati Uniti, in Giappone.

L'interesse per l'uso di tecnologie cellulari in dermatologia e cosmetologia a causa del fatto che "composizione cellulare" portare un forte potenziale bioenergetico ed informativo, grazie al quale è possibile ottenere una qualitativamente nuovi risultati del trattamento. Le autokines rilasciate dalle cellule trapiantate (fattori di crescita, citochine, ossido nitrico, ecc.) Agiscono principalmente sui propri fibroblasti, aumentando la loro attività sintetica e proliferativa. Questo fatto è particolarmente interessante per i ricercatori, poiché il fibroblasto è la cellula chiave del derma, il cui stato funzionale dipende dallo stato di tutti gli strati della pelle. E 'noto anche che dopo Cauter lesioni della pelle, laser, aghi e altri strumenti, dal midollo osseo, tessuto adiposo e capillare pericyte viene rifornito con precursori staminali fibroblasti della pelle fresca che promuove piscina proprie cellule "ringiovanimento". Cominciano attivamente per sintetizzare fattori di collagene, elastina, enzimi, glicosaminoglicani, crescita, e altre molecole biologicamente attive, che porta ad aumentare l'idratazione e la vascolarizzazione del derma, migliorando la sua forza,