Aggregazione piastrinica con ristocetina (fattore di von Willebrand)

I valori di riferimento (norma) dell'attività del fattore di von Willebrand sono 58-166%.

Il fattore di von Willebrand è sintetizzato dalle cellule endoteliali e dai megacariociti. È necessario per la normale adesione piastrinica e ha la capacità di prolungare l'emivita del fattore VIII. Il fattore VIII della coagulazione plasmatica, la globulina A antiemofilica, circola nel sangue come un complesso di tre subunità denominate VIII-k (unità coagulante), VIII-Ag (il principale marcatore antigenico) e VIII-vWF (fattore di von Willebrand associato a VIII-Ag). Si ritiene che il fattore di von Willebrand regoli la sintesi della componente coagulante della globulina A antiemofilica (VIII-k) e sia coinvolto nell'emostasi vascolare-piastrinica.

La malattia di von Willebrand è una malattia ereditaria caratterizzata da un aumento del tempo di sanguinamento, una riduzione dell'attività del cofattore ristocetina e una riduzione (in varia misura) dell'attività coagulante del fattore VIII. Le manifestazioni cliniche della malattia sono simili a quelle della trombocitopatia. Tuttavia, i pazienti con una significativa riduzione dell'attività del fattore VIII possono presentare ematomi ed emartro.

Sulla base di studi di laboratorio che consentono di determinare la struttura e l'attività del fattore di von Willebrand, si distinguono le seguenti forme della malattia.

• Il tipo I (70% di tutti i casi) è caratterizzato da una leggera diminuzione del cofattore ristocetinico (fattore di von Willebrand) e dell'attività coagulante (VIII-k) con una normale struttura macromolecolare del fattore di von Willebrand.
• Tipo II: si basa su una carenza selettiva di polimeri ad alto peso molecolare del fattore di von Willebrand dovuta a disturbi nella struttura di questa proteina.
  • Il tipo IIB è causato da una maggiore interazione tra il fattore di von Willebrand e le piastrine; l'aumentata eliminazione degli aggregati piastrinici porta alla trombocitopenia.
• Il tipo III è caratterizzato da una grave carenza quantitativa del fattore di von Willebrand, che provoca una diminuzione clinicamente significativa dell'attività del fattore VIII (VIII-k).

Il contenuto di fattore di von Willebrand viene determinato nei casi in cui il tempo di sanguinamento è aumentato, la conta piastrinica rientra nei valori di riferimento e non vi sono cause evidenti di disfunzione piastrinica. Per valutare il fattore di von Willebrand, viene determinato il contenuto quantitativo del fattore di von Willebrand (studio dell'attività del cofattore ristocetina), vengono studiate l'agglutinazione piastrinica indotta da ristocetina e la struttura antigenica del fattore di von Willebrand associato al fattore VIII (VIII-vWF).

La determinazione dell'aggregazione piastrinica con ristocetina nel plasma viene utilizzata per la valutazione quantitativa del fattore di von Willebrand. È stata stabilita una relazione lineare tra il grado di aggregazione della ristocetina e la quantità di fattore di von Willebrand. Il metodo si basa sulla capacità di questo antibiotico (ristocetina) di stimolare in vitro l'interazione del fattore di von Willebrand con la glicoproteina piastrinica Ib. Nella maggior parte dei casi di malattia di von Willebrand, si osserva una compromissione dell'aggregazione della ristocetina con una risposta normale ad ADP, collagene e adrenalina. Una compromissione dell'aggregazione della ristocetina viene rilevata anche nella trombostrofia macrocitica di Bernard-Soulier (assenza di recettori di aggregazione della ristocetina sulla membrana piastrinica). Per la differenziazione, viene utilizzato un test con aggiunta di plasma normale: nella malattia di von Willebrand, l'aggregazione della ristocetina si normalizza dopo l'aggiunta di plasma normale, mentre ciò non si verifica nella sindrome di Bernard-Soulier.

Lo studio può essere utilizzato anche nella diagnosi differenziale dell'emofilia A (deficit del fattore VIII) e della malattia di von Willebrand. Nell'emofilia, il contenuto di VIII-k è nettamente ridotto, mentre quello di VIII-fB rientra nei limiti della norma. Clinicamente, questa differenza si manifesta con il fatto che nell'emofilia si verifica un ematoma con aumento del sanguinamento, mentre nella malattia di von Willebrand si verifica un ematoma petecchiale.

L'agglutinazione piastrinica indotta dalla ristocetina è ridotta nella maggior parte dei casi di malattia di von Willebrand, ad eccezione del tipo IIB.

La struttura antigenica del fattore di von Willebrand associato al fattore VIII (VIII-vWF) viene rilevata mediante vari metodi immunologici, mentre la distribuzione del fattore di von Willebrand in base alle dimensioni molecolari viene determinata mediante elettroforesi su gel di agarosio. Questi test vengono utilizzati per stabilire il tipo di malattia di von Willebrand.

Lo studio dell'aggregazione piastrinica con diversi induttori non viene effettuato solo per identificare alterazioni della funzione di aggregazione piastrinica. Questo studio consente di valutare l'efficacia della terapia antiaggregante, di selezionare le dosi individuali di farmaco e di monitorarne l'efficacia.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ], [ 8 ], [ 9 ], [ 10 ], [ 11 ]