Metodi immunologici per diagnosticare malattie ereditarie

Recentemente, come importante marker immunologico della genetica della popolazione, è stato preso in considerazione il principale complesso di istocompatibilità - HLA (Human Leukocyte Antigens). Gli antigeni di questo sistema sono immunologicamente determinati nei leucociti del sangue. Il complesso dei geni HLA è localizzato in modo compatto sul braccio corto del cromosoma 6 (6p21.3). La localizzazione di questo sistema e la lunghezza della posizione dei suoi loci sul cromosoma hanno permesso di calcolare che il complesso è circa 1/1000 del pool genico dell'organismo. Gli antigeni di istocompatibilità sono coinvolti nella regolazione della risposta immunitaria del corpo, nel mantenimento dell'omeostasi immunitaria. A causa del suo polimorfismo e compattezza della localizzazione degli antigeni, l'HLA ha acquisito grande importanza come marker genetico.

Attualmente, sono stati trovati più di 200 alleli di questo sistema, è il più polimorfico e biologicamente significativo dei sistemi genetici del corpo umano. Le violazioni di varie funzioni del complesso principale di istocompatibilità contribuiscono allo sviluppo di un numero di malattie, principalmente autoimmune, oncological e infettivo.

In conformità con il complesso HLA sul cromosoma 6 sono seguenti loci: D / DR, B, C, A. Relativamente recentemente scoperto nuovi loci G, E, H, F, il loro ruolo biologico esplorando attivamente al momento. Nel complesso principale di istocompatibilità, si distinguono tre classi di antigeni. Gli antigeni di classe I sono codificati dai loci A, B, C. Anche i nuovi loci appartengono a questa classe. Gli antigeni di classe II sono codificati dai loci DR, DP, DQ, DN, DO. Le classi di geni I e II codificano gli antigeni del trapianto. Classe III geni codificanti componenti del complemento (C2, C4a, C4b, Bf), e anche la sintesi di diverse isoforme enzimi (fosfoglucomutasi, glikoksilazy, Pepsinogeno-5, 21-idrossilasi).

La presenza di una persona associata a una certa malattia di Ar ci permette di assumere una maggiore predisposizione a questa patologia, e con alcune correlazioni, al contrario, la resistenza ad essa.

La determinazione degli antigeni del sistema HLA viene effettuata su linfociti isolati dal sangue periferico, utilizzando sieri di istotipo in una reazione microlinfotossica o mediante metodi di genetica molecolare.

Stabilire legami associativi tra malattie e antigene del complesso principale di istocompatibilità consente:

• identificare i gruppi a maggior rischio di sviluppare la malattia;
• determinare il suo polimorfismo, cioè identificare gruppi di pazienti con caratteristiche del decorso o patogenesi della malattia; nello stesso piano, un'analisi della sintesi delle malattie, la delucidazione delle precondizioni genetiche per combinare varie forme di patologia; associazione con antigeni che determinano la resistenza alle malattie, consente di identificare le persone con un rischio ridotto di questa patologia;
• condurre diagnosi differenziale di malattie;
• determinare la previsione;
• sviluppare tattiche di trattamento ottimali.

A causa del fatto che la maggior parte delle malattie comunicazione diretta con antigeni MHC non è tracciato, per spiegare l'associazione tra malattia e antigeni HLA stato proposto teoria "due geni", secondo cui il gene previsto esistere (geni) risposta immunitaria (Ir-geni) strettamente correlato agli antigeni HLA e ai geni che regolano la risposta immunitaria. I geni protettivi determinano la resistenza alle malattie e i geni provocatori - la sensibilità a determinate malattie.

Il rischio relativo di malattia per gli individui con adeguata genotipo è calcolato secondo la formula: x = [h _p × (1 - h _c )] / [h _c × (1 - h _p )], dove h _p - frequenza caratteristica in pazienti, e h _c - nel gruppo di controllo.

Il rischio relativo mostra il valore di associazione della malattia con un certo Ar / Ar del sistema HLA (dà un'idea di quante volte il rischio di malattia è in presenza di Ar rispetto alla sua assenza). Più questo indicatore è nel paziente, maggiore è il rapporto associativo con la malattia.

Associazione delle Malattie Umane con HLA-Ar (frequenza genica,%)

Malattia	HLA	Gruppo di controllo,%	I pazienti%	Rischio relativo
Reumatologia
Spondilite anchilosante	В27	5-7	90-93	90-150
Sindrome di Wright	В27	6-9	69-76	32-49,6
Artrite causata da infezioni:
- Yersinia	В27		58-76	17.59
- Salmonella	В27		60-69	17.57
Artrite psoriasica	C13		9-37	4.79
Artrite reumatoide	DW4	12-19	48-72	3,9-12,0
	DR4	20-32	70	4,9-9,33
Sindrome di Behçet	V5	13	48-86	7.4 - 16.4
SCR	V5		11-34	1.83
	V8		19-48	2.11
	Bw15	6-10	21-40	5.1
	DR2	26.4	57.1	3.80
	DR3	22.2	46.4	2.90
Sindrome di Gujero-Sjogren	V8		38-58	3.15
	DW3	26	69-87	19,0
Cardiologia
IBS	В7	27.8	45.8	2.19
	B14	7.5	14.8	2.14
	V15	11.1	20.4	2.05
	SW4	18.7	32.8	2.12
Malattia ipertensiva	V18	10.4	22.6	2.52
	Аw19	12.6	28.3	2.74
Endocrinologia
Diabete mellito di tipo 1	V8	32	52-55	2,1-2,5
	V18		5-59	1.65
	V15	12	18-36	1,89-3,9
	DW3	26	48-50	2,9-3,8
	DW4	19	42-49	3,5-3,9
	DR3 DR3 / DR4	20	60	6,10 33
Ipertiroidismo	V8	21	35-49	2,34-3,5
	D3	26	61	4.4
	DR3	20	51	4.16
Tiroidite subacuta (de Kervena)	Bw35	13	63-73	16.81
	DW1		33	2.1
La malattia di Addison	V8		20-80	3,88-6,4
	DW3	26	70-76	8,8-10,5
Sindrome di Isenko-Cushing	A1		49	2.45
Gastroenterologia
Anemia perniciosa	В7	19	26-52	1,7-3,1
	DR5	6	25	5.20
Gastrite atrofica	В7		37	2.55
Malattia ulcera peptica del duodeno	A2	48.1	61.3	1.7
	A10	20,6	63,3	6.65
	B14	4.0	10.3	2.76
	V15	6.6	24.4	4.56
	B40	9.72	23.3	2.82
Epatite autoimmune	V8	16	37-68	2,8-4,1
	DR4	24	71	7.75
Vettori di HBsAg	Bw41		12	11.16
	V15		10-19	0,29

Malattia	HLA	Gruppo di controllo,%	I pazienti%	Rischio relativo
Dermatologia
Psoriasi	Bw17	6-8	22-36	3,8-6,4
	C13	3-5	15-27	4,2-5,3
	Bw16	5	15	2.9
Dermatite erpetiforme	V8	27-29	62-63	4,00-4,6
	DR3	19	80	16,60
Sclerodermia	В7	24	35	1.7
Pemfigo	A10			3.1
Dermatite atopica	C13	6.86	21.28	3.67
	В27	9.94	25,53	3.11
	A10 / B13	0.88	8.51	10.48
Eczema	A10	19.64	36.67	2.37
	В27	9.94	26.67	3.29
Orticaria ed edema Quincke	C13	6.86	21.21	3.65
	V5,8	1.42	12.12	9.57
	V5,35	0.71	6.06	9.02
Neurologia
Sclerosi multipla	А3	25	36-37	2,7-2,8
	В7	25-33	36-42	1,4-2,0
	DW2	16-26	60-70	4,3-12,2
	DR2	35	51.2	1.95
	DR3	20	32,5	1.93
Miastenia	V8	21-24	52-57	3,4-5,0
	A1	20-25	23-56	3.8
	DR3	26	50	2.5
Pneumologia
Asma bronchiale (che si ammalò all'età di 19-30 anni)	V21	4.62	12.5	2.95
	В22	9.94	19.64	2.22
	В27	12.31	37.5	4.27
	В35	0,11	5.36	51.4
	Â27 / 35	0.47	7.14	16.2
Altre malattie
Rinite vasomotoria	А3	26.98	52.38	2.98
	V17	7.57	28.57	4.88
	3/10	2.72	23.83	11.18
	17/17	0.47	9.52	22.28

I dati nella tabella mostrano che i collegamenti associativi più forti sono identificati per le malattie con un tipo di eredità poligenico o multifattoriale.

Pertanto, la determinazione di antigeni del complesso maggiore di istocompatibilità di cellule del sangue (leucociti) rivela il grado di predisposizione umana individuale ad una specifica malattia, e in alcuni casi utilizzare i risultati delle ricerche per la diagnosi differenziale, prognosi, valutazione e selezione del trattamento. Ad esempio, il rilevamento degli antigeni HLA-B27 viene utilizzato nella diagnosi differenziale delle malattie autoimmuni. Si trova nel 90-93% dei pazienti della razza caucasoide con spondilite anchilosante e sindrome di Reiter. In soggetti sani di questa razza, gli antigeni HLA-B27 sono rilevati solo nel 5-7% dei casi. Gli antigeni HLA-B27 si trovano spesso nell'artrite psoriasica, nelle malattie infiammatorie croniche intestinali che si verificano con sacroileite e spondilite, uveite e artrite reattiva.

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