Analisi delle feci per i protozoi

L'individuazione e la differenziazione dei protozoi nell'analisi delle feci (distinguendo le forme patogene da quelle non patogene) è un compito piuttosto complesso. La maggior parte degli organismi unicellulari nelle feci si trova in due forme: vegetativa (stadio trofozoita) - attiva, mobile, vitale, facilmente suscettibile agli effetti nocivi (in particolare, al raffreddamento) e quindi destinata a morire rapidamente dopo essere stata espulsa dall'intestino, e sotto forma di cisti (oocisti) resistenti alle influenze esterne. Nelle feci formate, i protozoi si trovano solitamente solo allo stato incistato; per rilevare le forme vegetative, è necessario esaminare le feci mentre sono ancora calde. Ciò è dovuto al fatto che nelle feci raffreddate, le forme vegetative dei protozoi muoiono rapidamente e, una volta morte, sono rapidamente soggette all'azione degli enzimi proteolitici, a causa della quale perdono le caratteristiche della loro struttura. Inoltre, con il raffreddamento, la mobilità dei protozoi diminuisce e poi scompare, un importante fattore ausiliario nella loro differenziazione.

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Tipi di parassiti nelle feci

I principali tipi di parassiti e i metodi migliori per rilevarli

Tipo di parassita	Organi comunemente colpiti	Metodo diagnostico
Leishmania donovani	Milza, fegato, linfonodi	Rilevamento di parassiti in punture di milza, fegato, midollo osseo, pelle interessata, rilevamento di anticorpi specifici nel sangue
Trypanosoma rhodesiense e T. gambiense	Linfonodi e cervello	Rilevamento di parassiti nella pelle interessata, nei linfonodi, nel liquido cerebrospinale
Echinococcus granulosus o Echinococcus multilocularis	Fegato, polmoni, cervello	Rilevazione di anticorpi specifici nel sangue
Schistosoma haematobium, S. mansoni, S. japonicum, ecc.	Vie urinarie, fegato, vena porta	Rilevamento di uova di parassiti nelle urine, nelle feci, nella biopsia rettale, nel tessuto epatico o di anticorpi specifici nel sangue
Fasciola hepatica	Fegato	Rilevazione di uova di parassiti nelle feci o di anticorpi specifici nel sangue
Clonorchis sinensis, Opisthorchis felineus, Opisthorchis viverrini	Sistema biliare	Rilevamento di uova di parassiti nelle feci o nella bile
Trichostrongylus capricola, T. vitrinus	Intestino tenue	Rilevazione di uova di parassiti nelle feci
Echinostoma ilocanum	Intestino tenue	Rilevazione di uova di parassiti nelle feci
Angiostrongylus costaricensis	Intestino tenue e crasso	Rilevamento delle uova Nella biopsia intestinale
Dipylidum caninum	Intestino tenue e crasso	Rilevamento di uova di parassiti o feci ingerite

Esistono 20 specie di protozoi (8 patogeni e opportunisti e 12 commensali) che possono essere rilevate nelle feci. I protozoi intestinali vivono nell'intestino tenue o crasso allo stadio di trofozoite e/o cisti. Appartengono a uno dei 4 gruppi: amebe, flagellati, ciliati e coccidi.

Ameba dissenterica nelle feci

Entamoeba histolytica (ameba dissenteria) causa amebiasi nell'uomo. È localizzata nell'intestino crasso ed escreta sotto forma di trofozoiti (con feci liquide) e/o cisti (nelle feci formate). Poiché la maggior parte dei tipi di amebe (intestinali, di Hartmann, di Bütschli) non sono patogene per l'uomo, si raccomanda la massima cautela nella valutazione dei risultati di un esame fecale. Solo il rilevamento di trofozoiti ematofagi (forma tissutale di E. histolytica forma magna) può costituire un segno affidabile di dissenteria amebica e/o colite ulcerosa amebica in un paziente. La presenza di eritrociti nel protoplasma delle amebe è un segno diagnostico molto importante, poiché le forme non patogene di amebe non li contengono mai. In tutti gli altri casi, il rilevamento di forme di trofozoiti simili a E. histolytica prive di eritrociti non costituisce una base per la diagnosi di amebiasi come malattia. I risultati del rilevamento delle sole cisti di E. histolytica (forma luminale), che possono essere rilevate in individui in fase di guarigione da amebiasi acuta, in coloro che soffrono della forma cronica di amebiasi e nei portatori, vengono valutati in modo analogo.

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Giardia nelle feci

Lamblia intestinalis (Giardia) appartiene alla classe dei flagellati. La Giardia parassita l'intestino tenue, principalmente nel duodeno, e anche nella cistifellea. La presenza di trofozoiti (la forma vegetativa di Giardia) richiede un ambiente liquido, pertanto, quando entra nell'intestino crasso, la Giardia si incista e nelle feci si trovano solo cisti. Solo in caso di diarrea profusa o dopo l'azione di lassativi è possibile rilevare forme vegetative nelle feci.

Balantidia nelle feci

Balantidium coli è l'unico parassita ciliato presente nell'intestino umano che causa malattie di varia gravità, da una lieve colite a gravi lesioni ulcerative. Il patogeno si trova nelle feci sotto forma di trofozoiti o cisti. La presenza del parassita è possibile in persone sane.

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Cryptosporidium nelle feci

I rappresentanti del genere Cryptosporidium sono attualmente considerati i più importanti agenti causali della diarrea. I Cryptosporidium (dal greco "spora nascosta") sono parassiti obbligati che colpiscono i microvilli delle mucose del tratto gastrointestinale e respiratorio di esseri umani e animali. Infezioni gastrointestinali causate da criptosporidi sono state registrate in tutti i paesi del mondo. Una così ampia distribuzione della criptosporidiosi è associata a un gran numero di serbatoi naturali di infezione, a una bassa dose infettante e a un'elevata resistenza del patogeno a disinfettanti e farmaci antiparassitari.

Tra i criptosporidi, le specie potenzialmente patogene per l'uomo sono Cryptosporidium parvum e Cryptosporidium felis (identificate in individui con infezione da HIV). La localizzazione più tipica dell'infezione nell'uomo è il tratto distale dell'intestino tenue. Nei pazienti con immunodeficienze gravi, l'infezione può interessare l'intero tratto gastrointestinale, dall'orofaringe alla mucosa del retto.

La diagnosi di criptosporidiosi si basa nella maggior parte dei casi sul rilevamento di oocisti di criptosporidi nelle feci e/o (molto meno frequentemente) in una biopsia della mucosa dell'intestino tenue in caso di sindrome da diarrea acquosa. Viene utilizzata la microscopia di preparati colorati con Gram. Nella maggior parte dei casi, questo metodo di colorazione non consente il rilevamento delle oocisti a causa della loro scarsa capacità di trattenere il colorante e dell'impossibilità di distinguerle dai funghi lievitiformi. Pertanto, si utilizza la colorazione acido-resistente. Con questo metodo di colorazione, le oocisti di criptosporidi si colorano di rosso o rosa e sono chiaramente visibili sullo sfondo blu-violetto in cui sono colorati altri microrganismi e il contenuto intestinale.

Nella criptosporidiosi acuta, il numero di oocisti nelle feci è elevato, il che le rende facilmente rilevabili al microscopio su preparati colorati. Tuttavia, nella criptosporidiosi cronica con decorso lieve, quando il numero di oocisti nelle feci è basso, è necessario utilizzare metodi di arricchimento per aumentarne la probabilità di rilevamento. Negli ultimi anni, i metodi sierologici sono diventati comuni per la diagnosi di criptosporidiosi.

La criptosporidiosi delle vie biliari può manifestarsi come colecistite, molto meno frequentemente come epatite (con aumento della concentrazione di bilirubina, AST, ALT e attività della fosfatasi alcalina nel sangue) e colangite sclerosante. Per diagnosticare la criptosporidiosi biliare, vengono esaminate biopsie epatiche e biliari, dove i criptosporidi possono essere rilevati in vari stadi di sviluppo.

Per monitorare l'efficacia del trattamento delle lesioni intestinali da protozoi, le feci vengono esaminate a seconda della malattia identificata: in caso di amebiasi e balantidiasi, immediatamente dopo il trattamento, in caso di giardiasi, dopo 1 settimana. Dopo il trattamento delle infestazioni delle vie biliari, l'efficacia può essere monitorata sia esaminando le feci che la bile.

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Raschiamento delle pieghe perianali per l'enterobiasi

Il raschiamento delle pieghe perianali per l'enterobiasi è un test mirato per rilevare le uova di ossiuri (Enterobius vermicularis). Poiché le femmine adulte degli ossiuri strisciano fuori per deporre le uova nelle pieghe perianali, le uova di ossiuri si trovano raramente nelle feci; sono più facili da individuare nei raschiamento delle pieghe perianali o nel muco rettale.