Mononucleosi infettiva: anticorpi contro il virus Epstein-Barr nel sangue

La mononucleosi infettiva è una comune malattia linfoproliferativa sistemica, più comunemente causata dal virus Epstein-Barr. Toxoplasma gondii e altri virus (CMV, virus dell'immunodeficienza umana e herpesvirus umano di tipo 6, riconosciuti come causa di esantema improvviso) possono causare malattie clinicamente simili. Questi stessi agenti eziologici sono presumibilmente in grado di causare lo sviluppo della sindrome da stanchezza cronica.

Il virus Epstein-Barr è un virus del gruppo dell'herpes, ha un tropismo per i linfociti B, persiste a lungo nelle cellule ospiti come un'infezione latente. È ampiamente distribuito in tutto il mondo. Per struttura e dimensioni, il virus Epstein-Barr è indistinguibile da altri herpesvirus, ma differisce significativamente da essi nelle proprietà antigeniche. Il virus ha un antigene di membrana (antigene della membrana MA), un antigene nucleare (antigene nucleico di EBNA-Epstein-Barris) e un antigene del capside virale (VCA).

L'infezione si verifica quando il virus viene trasmesso con la saliva. Il virus Epstein-Barr, quando ingerito, infetta l'epitelio faringeo, causando infiammazione e segni clinici tipici della febbre all'insorgenza della mononucleosi infettiva. Rigorosamente virus della leucemia, unendo S3α membrana cellulare del recettore dei linfociti B induce proliferazione dei linfociti B policlonali con un corrispondente aumento delle tonsille, linfoadenopatia sistemica e splenomegalia. Linfociti B vengono trasformate (acquisire la capacità di divisione infinita), e in assenza di una adeguata risposta immunitaria cellulare, questo processo può evolversi (ad esempio, la sindrome linfoproliferativa legata al cromosoma X) ovviamente maligno. Se i fattori di immunità cellulare controllano la replicazione del virus Epstein-Barr nel corpo, i sintomi clinici della mononucleosi infettiva scompaiono gradualmente.

Come altri herpesvirus, virus di Epstein-Barr può persistere in un'infezione latente (suo DNA contenuto nel nucleo di una piccola quantità di linfociti B). La riattivazione episodica asintomatica dell'infezione è comune, circa il 20% dei giovani sani espelle il virus Epstein-Barr con la saliva. In individui con un'immunità cellulare danneggiata (per esempio, AIDS, atassia-telangiectasia, nei pazienti trapiantati) possono sviluppare una chiara infezione reattivo con leucoplachia pelosa, polmonite interstiziale, o sotto forma di un linfoma a cellule B monoclonali. Con il virus Epstein-Barr, l'eziologia del carcinoma nasofaringeo e del linfoma di Burkitt è collegata.

Una delle manifestazioni della mononucleosi infettiva è la comparsa nel sangue periferico di linfociti atipici (fino al 10% del numero totale di linfociti). I linfociti atipici si trovano nel sangue dall'inizio del periodo di manifestazioni cliniche di infezione. Il loro contenuto nel sangue raggiunge un picco alla fine del 2 ° o all'inizio della 3 ° settimana e può mantenersi a questo livello fino a 1,5-2 mesi, la completa scomparsa di solito avviene all'inizio del 4 ° mese dall'inizio della malattia. La presenza di linfociti atipici è un segno relativamente insensibile dell'infezione causata dal virus Epstein-Barr, ma ha una specificità totale di circa il 95%.

La proliferazione delle policlonali linfociti B a infezione causata dal virus di Epstein-Barr, genera una grande varietà di autoanticorpi nel paziente, come IgM anti i-(agglutinine a freddo), fattore reumatoide, anticorpi antinucleari. La maggior parte delle Ig insolite che compaiono nella mononucleosi infettiva sono chiamate anticorpi eterofili di Paul-Bunnel. Questi anticorpi sono classificati come IgM, hanno un'affinità per gli eritrociti di montone e cavallo, non diretti ad alcun antigene del virus Epstein-Barr. Eterofili anticorpi - Random prodotti B-linfoide proliferazione (causata dal virus di Epstein-Barr), compaiono nella prima settimana di mononucleosi infettiva e scompaiono gradualmente durante la convalescenza, che di solito non sono rilevati in 3-6 mesi.

Quando lo stadio acuto iniziale dell'infezione diventa latente, i genomi del virus Epstein-Barr (antigeni unici) appaiono in gran numero in tutte le cellule e l'antigene nucleare viene rilasciato nell'ambiente. In risposta all'antigene, gli anticorpi specifici sono marcatori sintetizzati di valore della fase della malattia. Poco dopo l'infezione dei linfociti B, viene rilevato un antigene precoce (EA), una proteina necessaria per la replicazione del virus Epstein-Barr (e non una componente virale strutturale). All'antigene precoce nel corpo del paziente, gli anticorpi delle classi IgM e IgG sono sintetizzati. Insieme al virus virale completo del virus Epstein-Barr, appaiono antigeni del capside virale (VCA) e dell'antigene di membrana (MA). Mentre il processo infettivo si attenua, una piccola percentuale di linfociti B infettati dal virus Epstein-Barr evita la distruzione immunitaria e mantiene il genoma virale in una forma latente. L'antigene nucleare (EBNA) del virus Epstein-Barr è responsabile della sua duplicazione e sopravvivenza.

Test di laboratorio possono rilevare anticorpi contro vari antigeni.

Dai metodi sierologici per diagnosticare la mononucleosi infettiva, la reazione di Paul-Bunnel (agglutinazione) è più comune, volta a rilevare anticorpi eterofili nel siero. Il titolo degli anticorpi eterofili 1: 224 e superiori nel siero del paziente è riconosciuto come significativo dal punto di vista diagnostico, confermando la diagnosi di mononucleosi infettiva. L'agglutinazione eterofila è positiva nel 60% dei giovani dopo 2 settimane e nel 90% dopo 4 settimane dall'inizio delle manifestazioni cliniche della malattia. Pertanto, sono necessari diversi studi per diagnosticare la mononucleosi infettiva: durante la prima settimana della malattia (la reazione può essere negativa) e 1-2 settimane dopo (la reazione può diventare positiva). Il contenuto di anticorpi eterofili diminuisce dopo la fine del periodo acuto del processo infettivo, ma il loro titolo può essere determinato entro 9 mesi dall'insorgenza dei sintomi clinici. La reazione di Paul-Bunnel può passare da positiva a negativa, anche sullo sfondo dei sintomi ematologici e clinici residui nel paziente. La sensibilità del metodo negli adulti è del 98%, la specificità del 99%. Nei bambini con mononucleosi infettiva prima dei 2 anni, gli anticorpi eterofili possono essere rilevati solo nel 30% dei pazienti, all'età di 2-4 anni - nel 75%, oltre i 4 anni - in più del 90%. La sensibilità del metodo nei bambini è inferiore al 70%, la specificità è del 20%. La riduzione e quindi il ri-aumento del titolo di anticorpi eterofili può verificarsi in risposta a un'altra infezione (il più delle volte in infezioni virali del tratto respiratorio superiore). La risposta di Paul-Bunnel non è specifica per il virus Epstein-Barr. Il titolo di anticorpi eterofili non fornisce una reazione crociata e non è correlato con anticorpi specifici del virus Epstein-Barr, né è correlato con la gravità del decorso della malattia. Il test è inutile per diagnosticare la forma cronica di mononucleosi infettiva (in media solo nel 10% dei pazienti).

Titoli 1:56 o meno possono essere trovati in persone sane e in pazienti con altre malattie (artrite reumatoide, rosolia). I risultati dei test falsi positivi sono incontrati molto raramente.

Allo stato attuale, il metodo di "single spot" (agglutinazione su vetrino) viene utilizzato per determinare gli anticorpi contro gli eritrociti di una ram, inizialmente utilizzato come test di screening. Per sensibilità, è paragonabile alla reazione di Paul-Bunnel. Scivolo falsi positivi test possono essere di circa il 2% degli studi (leucemia, linfoma maligno, malaria, rosolia, epatite virale, carcinoma del pancreas) e adulti falsi negativi - 5-7% dei casi.

Va notato che lo spettro dei sistemi di test diagnostici prodotti dalle aziende sulla base della determinazione del titolo anticorpale è molto ampio, per cui è necessario concentrarsi sul titolo diagnostico degli anticorpi specificati nelle istruzioni per i sistemi di test.

Se non vengono rilevati anticorpi eterofili e il quadro clinico della malattia corrisponde alla mononucleosi infettiva, è necessario esaminare il siero per anticorpi specifici delle classi IgM e IgG. Per la rilevazione di anticorpi specifici contro il virus di Epstein-Barr con metodi di immunofluorescenza indiretta (permette di rilevare gli anticorpi contro gli antigeni VCA e EA) antialexin-immunofluorescenza (rilevare gli anticorpi a EA, VCA e EBNA antigene) e IFA.

Gli anticorpi del componente D antigene EA (anti-EA-D) compaiono anche nel periodo di latenza dell'infezione primaria e scompaiono rapidamente con il recupero.

Gli anticorpi del componente R antigene EA (anti-EA-R) possono essere rilevati 3-4 settimane dopo le manifestazioni cliniche della malattia. Essi persistono nel siero del sangue per circa un anno, spesso rilevati con correnti atipiche o protratte di mononucleosi infettiva. Di solito, questi anticorpi si trovano con il linfoma di Burkitt.

Gli anticorpi anti-VCA di classe IgM (anti-VCA IgM) compaiono molto presto, di solito a sintomi clinici, sono rilevati all'inizio della malattia nel 100% dei casi. Titoli elevati si verificano nella 1-6a settimana dall'inizio della malattia, iniziano a diminuire dalla terza settimana e di solito scompaiono dopo 1-6 mesi. L'IgM anti-VCA è quasi sempre presente nel siero con infezione attiva, quindi il metodo di rilevazione è molto sensibile e specifico per un episodio acuto di mononucleosi infettiva.

Gli anticorpi anti-VCA di classe IgG (anti-VCA IgG) possono comparire precocemente (nella 1-4 ° settimana), la loro quantità raggiunge un picco entro il 2 ° mese dalla malattia. All'inizio della malattia, si trovano nel 100% dei casi. Solo il 20% dei pazienti ha mostrato un aumento di 4 volte del titolo nello studio dei sieri accoppiati. Il titolo diminuisce al recupero, ma si trova entro diversi anni dopo l'infezione trasferita, quindi è inutile per la diagnosi di mononucleosi infettiva. La presenza di IgG anti-VCA indica uno stato dopo l'infezione e l'immunità.

Gli anticorpi anti EBNA (anti-EBNA) compaiono più tardi di tutti, sono raramente presenti nella fase acuta della malattia. Il loro contenuto aumenta durante il periodo di recupero (entro 3-12 mesi), possono persistere nel sangue per molti anni dopo la malattia. La mancanza di anti-EBNA in presenza di IgM anti-VCA e IgM anti-EA indica un'infezione in corso. Il rilevamento di anti-EBNA dopo una reazione precedentemente negativa indica un'infezione esistente. Quando si utilizza il metodo ELISA, è possibile rilevare contemporaneamente la presenza di classi anti-EBNA di IgM e IgG. Se la quantità di IgM anti-EBNA è maggiore dell'anti-EBNA IgG, si deve prendere in considerazione un'infezione acuta, con la relazione inversa come precedente.

A favore di un'infezione primaria acuta, uno o più dei seguenti sintomi indicano la presenza di:

• IgG anti-VCA (rilevate presto e in seguito il contenuto è ridotto);
• Titolo alto (più di 1: 320) o aumento di 4 volte del titolo di IgG anti-VCA durante il decorso della malattia;
• un aumento transitorio del titolo di anti-EA-D (1:10 o più);
• precoce IgG anti-VCA senza anti-EBNA, e in seguito - l'emergere di anti-EBNA.

L'infezione acuta o primaria causata dal virus Epstein-Barr è esclusa se i titoli anti-VCA IgG e anti-EBNA nel siero non cambiano quando testati in dinamica (periodo acuto e recupero).

La presenza costante di antigene precoce e IgG anti-VCA in alti titoli indica una fase cronica di infezione.

L'individuazione di anticorpi contro il virus Epstein-Barr viene utilizzata per diagnosticare la mononucleosi infettiva e le infezioni croniche causate dal virus Epstein-Barr.

Anticorpi per il virus di Epstein-Barr possono essere rilevati nelle seguenti patologie: immunodeficienza secondaria, tra cui l'infezione da HIV, carcinoma nasofaringeo, linfoma di Burkitt, infezione da CMV, sifilide, malattia di Lyme, brucellosi, e altri.

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