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Blotting meridionale
Ultima recensione: 05.07.2025
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Il Southern blotting (sviluppato da E. Southern e R. Davis nel 1975) è il metodo principale attualmente utilizzato per identificare i geni di una specifica malattia. A tal fine, il DNA viene estratto dalle cellule del paziente e trattato con una o più endonucleasi di restrizione. I frammenti risultanti vengono sottoposti a elettroforesi, che consente di separarli in base alle dimensioni (i frammenti più piccoli attraversano più velocemente i pori del gel). I frammenti vengono quindi trasferiti (ristampati) su un filtro di nitrocellulosa, su cui è stratificata una sonda marcata radioattivamente. La sonda si lega solo alla sequenza complementare. Quindi, utilizzando l'autoradiografia, viene determinata la posizione del frammento di DNA genomico desiderato sull'elettroferogramma.
L'ibridazione con una sonda di DNA marcata di preparazioni di DNA o RNA applicate goccia a goccia su una matrice solida senza restrizioni preliminari ed elettroforesi è chiamata ibridazione a punti o a fessure, a seconda della configurazione del punto di DNA sul filtro (rispettivamente rotonda o oblunga).
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