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Sauzern-blotting
Ultima recensione: 23.04.2024
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Southern blotting (sviluppato da E. Southern e R. Davies nel 1975) è il metodo principale con cui vengono identificati i geni di una particolare malattia. Per questo, il DNA dalle cellule del paziente viene estratto ed elaborato con una delle endonucleasi di restrizione (o più). I frammenti risultanti sono sottoposti a elettroforesi, che consente loro di essere dimensionati in termini di dimensioni (frammenti più piccoli si muovono più velocemente attraverso i pori del gel). Quindi i frammenti vengono trasferiti (ristampati) su un filtro di nitrocellulosa, sul quale è disposta la sonda radiomarcata. La sonda si lega solo alla sequenza complementare. Quindi, con il metodo dell'autoradiografia, viene determinata la posizione del frammento desiderato del DNA genomico sull'elettroforegramma.
Ibridazione con la sonda di DNA preparati di RNA o DNA marcate, gocciolamento inferto alla matrice solida senza previo restrizione ed elettroforesi è chiamato Dot e scanalatura ibridazione a seconda della configurazione dei punti DNA sul filtro (rotonda o allungata, rispettivamente).
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