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Ibridazione in situ
Ultima recensione: 23.04.2024
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La procedura di ibridazione può essere eseguita non solo sul gel, sui filtri o in soluzione, ma anche sui preparati istologici o cromosomici. Questo metodo è chiamato ibridazione in situ. Metodo realizzazione in cui la sonda come DNA o RNA preparati marcati con fluorocromi, chiamato FISH (fluoresceina in situ hybradization). La sonda di DNA marcata viene applicata a preparazioni di colori diversi e preparate per i cromosomi in metafase di ibridazione (denaturata). Il pretrattamento dei cromosomi viene utilizzato per facilitare l'accesso della sonda al DNA genomico. Dopo lavaggio molecole di DNA legati e applicando un'emulsione fotosensibile (utilizzando un marcatore radioattivo) o del corrispondente trattamento (usando biotin- o marcato con fluoresceina sonde DNA) la localizzazione delle sequenze di DNA complementare alla sonda di DNA utilizzato, può identificarsi quando microscopia la forma di punti caratteristici sulle parti corrispondenti di alcuni cromosomi.
Questo metodo di indagine consente di determinare non solo l'accessorio cromosomico, ma anche la localizzazione intracromosomica del gene in esame.
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