Test NST spontaneo

Un test spontaneo con NBT (nitroblu di tetrazolio) permette di valutare in vitro lo stato del meccanismo battericida ossigeno-dipendente dei fagociti del sangue (granulociti).

Normalmente, negli adulti, il numero di neutrofili NBT-positivi arriva fino al 10%.

Caratterizza lo stato e il grado di attivazione del sistema antibatterico intracellulare NADPH-ossidasi. Il principio del metodo si basa sulla conversione del colorante solubile NBT, assorbito dal fagocita, in diformazano insolubile sotto l'azione dell'anione superossido (destinato alla distruzione intracellulare dell'agente infettivo dopo il suo assorbimento), formatosi nella reazione della NADPH-ossidasi. Gli indicatori del test NBT aumentano nella fase iniziale delle infezioni batteriche acute, mentre diminuiscono nel decorso subacuto e cronico del processo infettivo. La disinfezione dell'organismo dal patogeno è accompagnata dalla normalizzazione dell'indicatore. Una brusca diminuzione indica uno scompenso della protezione anti-infettiva ed è considerata un segno prognosticamente sfavorevole.

Il test NBT svolge un ruolo importante nella diagnosi delle malattie granulomatose croniche, caratterizzate dalla presenza di difetti nel complesso NADPH ossidasi. I pazienti con malattie granulomatose croniche sono caratterizzati dalla presenza di infezioni ricorrenti (polmonite, linfoadenite, ascessi polmonari, epatici e cutanei) causate da Staphylococcus aureus, Klebsiella spp., Candida albicans, Salmonella spp., Escherichia coli, Aspergillus spp., Pseudomonas cepacia, Mycobacterium spp. e Pneumocystis carinii.

I neutrofili nei pazienti con malattie granulomatose croniche hanno una normale funzione fagocitaria, ma a causa di un difetto nel complesso della NADPH ossidasi, non sono in grado di distruggere i microrganismi. I difetti ereditari del complesso della NADPH ossidasi sono nella maggior parte dei casi legati al cromosoma X e, meno frequentemente, autosomici recessivi.

Una diminuzione del test spontaneo con NST è caratteristica di infiammazioni croniche, difetti congeniti del sistema fagocitario, immunodeficienze secondarie e primarie, infezione da HIV, neoplasie maligne, ustioni gravi, ferite, stress, malnutrizione, trattamento con citostatici e immunosoppressori ed esposizione a radiazioni ionizzanti.

Un aumento del test spontaneo con NST si nota in caso di irritazione antigenica dovuta a infiammazione batterica (periodo prodromico, periodo di manifestazione acuta dell'infezione con normale attività di fagocitosi), granulomatosi cronica, leucocitosi, aumento della citotossicità anticorpo-dipendente dei fagociti, malattie autoallergiche e allergie.

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Test attivato con NST

Normalmente, negli adulti, il numero di neutrofili NBT-positivi è pari al 40-80%.

Il test NBT attivato consente di valutare la riserva funzionale del meccanismo battericida ossigeno-dipendente dei fagociti. Il test viene utilizzato per identificare le capacità di riserva dei sistemi intracellulari dei fagociti. Con l'attività antibatterica intracellulare preservata nei fagociti, si osserva un netto aumento del numero di neutrofili formazano-positivi dopo la loro stimolazione con lattice. Una diminuzione dei valori del test NBT attivato dei neutrofili al di sotto del 40% e dei monociti al di sotto dell'87% indica una fagocitosi insufficiente.

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