Test per il papillomavirus umano: come eseguirli, decodificazione

Il papillomavirus umano rappresenta una seria minaccia. La diagnosi è necessaria per determinare il ceppo infettivo e il rischio di oncogenicità. Queste informazioni ci permettono di elaborare il piano terapeutico più appropriato ed efficace.

Diagnostica di alta qualità viene eseguita da diversi specialisti contemporaneamente. Le principali indicazioni per l'esame del corpo sono:

• Vita sessuale attiva e frequenti cambi di partner sessuali.
• Prurito, bruciore nella zona genitale, perdite atipiche.
• Comparsa di nuove escrescenze sulla pelle e sulle mucose sotto forma di papillomi, verruche e condilomi.

La diagnosi del papillomavirus si basa su un complesso di metodi di laboratorio e strumentali:

• Esame visivo e raccolta dell'anamnesi: il medico esamina le aree interessate e chiede quando sono comparse per la prima volta l'eruzione cutanea o altri segni di HPV. Valuta il tipo e la forma delle neoplasie. In presenza di escrescenze anogenitali, vengono eseguiti un esame della cervice e un'uretroscopia.
• Citologia su strisci e raschiati: viene eseguita per stabilire alterazioni morfologiche a livello cellulare associate all'HPV. L'accuratezza di questo metodo dipende dalla tecnica di raccolta del materiale e dalle qualifiche dei tecnici di laboratorio.
• La colposcopia è un esame della mucosa per rilevare forme subcliniche di infezione. La diagnosi è confermata dalla presenza dei seguenti fattori: leucoplachia, mosaico, puntura, zona di trasformazione anomala.
• La biopsia consiste nel prelievo di una piccola quantità di tessuto interessato per l'esame microscopico. Viene solitamente eseguita in caso di sospetto coinvolgimento cervicale.
• Esame istologico: il materiale ottenuto in seguito alla biopsia viene inviato per essere esaminato in laboratorio per identificare condizioni precancerose e altre anomalie cellulari.
• PCR – viene eseguita per identificare i singoli tipi di HPV. Per la diagnosi vengono utilizzati sangue, urina, muco e altri fluidi tissutali.
• Il test Digene è uno dei metodi diagnostici più affidabili. Presenta un'elevata sensibilità al papillomavirus umano. Permette di determinarne il genotipo e l'appartenenza al gruppo ad alto o basso livello di oncogenicità.

Oggigiorno esistono numerosi metodi che consentono di individuare l'infezione da HPV e di determinarne il grado di aggressività.

Screening per il papillomavirus umano

Un test obbligatorio per i pazienti con predisposizione a processi maligni nell'organismo è lo screening. Anche la ricerca del papillomavirus umano è un motivo valido per sottoporsi a questo test di laboratorio.

Il primo screening è raccomandato per le donne a partire dai 30 anni. L'analisi è necessaria non solo per rilevare il papillomavirus, ma anche per prevenire le lesioni erosive della cervice associate all'HPV.

Nella maggior parte dei casi, ai pazienti vengono prescritti i seguenti tipi di screening:

• PAP test citologico: si utilizza un raschiamento cervicale immerso in un mezzo liquido. Aiuta a identificare i ceppi oncologici di HPV in una fase precoce di sviluppo.
• Esteso: identifica i genotipi ad elevata oncogenicità e la loro concentrazione nell'organismo.
• La reazione a catena della polimerasi ha un elevato valore diagnostico, poiché consente di identificare tutti i tipi di papillomavirus umano.

Lo screening dell'HPV viene eseguito sia durante la diagnosi della malattia, sia durante la terapia e per valutare i risultati del trattamento.

Test del papillomavirus umano

In caso di sospetto di papillomavirus, a tutti i pazienti viene prescritta una serie di procedure diagnostiche. L'analisi dell'HPV consiste nella determinazione del tipo di virus in laboratorio. Per lo studio vengono utilizzati vari fluidi e tessuti biologici.

Il più delle volte, viene prelevato uno striscio dai genitali per l'analisi. Il prelievo di materiale da quest'area è necessario anche in assenza di sintomi visivi di papillomatosi. La biopsia risultante viene esaminata al microscopio per individuare cellule epiteliali alterate dal virus. Sulla base dei risultati diagnostici, vengono determinati il tipo di infezione e il rischio di oncogenicità.

È obbligatorio sottoporsi a un test per l'infezione papillomatosa quando si pianifica una gravidanza, per determinare le cause di infertilità e le patologie della gestazione. In questo caso, il test viene prescritto a entrambi i partner contemporaneamente. Ciò è dovuto al fatto che il virus si trasmette durante il contatto intimo. Sulla base dei risultati dello studio, il medico può prescrivere ulteriori metodi diagnostici e definire un piano terapeutico.

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Analisi quantitativa del papillomavirus umano

Per rilevare il papillomavirus, determinarne il tipo e il grado di attività, viene eseguita un'analisi quantitativa. Esistono diversi metodi per determinare l'HPV, vediamoli:

1. La reazione a catena della polimerasi (PCR) è lo standard per la diagnosi dell'HPV. L'analisi si basa sull'aumento del numero di copie di DNA virale in una biopsia. Questo metodo consente di rilevare anche singoli tipi di virus con elevata accuratezza.
2. Test Digene: la peculiarità di questo metodo è l'affidabile rilevamento di genotipi con elevata oncogenicità. Per l'analisi vengono utilizzati vari fluidi e materiali biologici.
3. Determinazione della presenza di anticorpi virali: l'analisi rivela proteine specifiche del sistema immunitario. Ogni agente virale che entra nell'organismo promuove la produzione di immunoglobuline specifiche. La presenza di anticorpi contro il papillomavirus umano nel siero sanguigno indica un'infezione.

Per condurre un'analisi quantitativa, vengono utilizzati sangue capillare (da un dito), raschiati cutanei e mucose e biopsie tissutali. 12 ore prima dell'esecuzione del test, è necessario interrompere l'assunzione di farmaci antimicotici, antivirali, antimicrobici e di altro tipo, inclusi i contraccettivi. Il giorno della diagnosi, è necessario fare una doccia e lavare accuratamente le parti intime, se si sono prelevati dei raschiati. Inoltre, 2-3 giorni prima della procedura, è necessario astenersi dai rapporti sessuali.

Il medico curante interpreta i risultati ottenuti. Il medico tiene conto non solo dei dati diagnostici eseguiti, ma anche delle manifestazioni cliniche della malattia. In caso contrario, i risultati potrebbero essere interpretati erroneamente.

DNA del papillomavirus umano, PCR

Uno dei metodi più comuni e affidabili per rilevare il DNA del papillomavirus umano è la PCR. Per condurre la reazione a catena della polimerasi vengono utilizzati diversi materiali biologici: sangue, urina, strisci di mucosa, liquido amniotico. L'analisi consente di stabilire la presenza di un'infezione anche se latente nell'organismo.

Il principio di questo metodo diagnostico si basa sull'isolamento del DNA umano e virale. Ogni acido desossiribonucleico è costituito da quattro nucleotidi:

• A – adenina.
• T – timidina.
• G – guanina.
• C – citosina.

Secondo le regole della genetica, hanno un certo ordine di combinazione: A+T, G+C. Tutti gli organismi viventi hanno il proprio DNA, che può essere isolato. La PCR riconosce frammenti di DNA patogeno, isolando così il patogeno.

Vantaggi della PCR:

1. Universalità: oltre al papillomavirus umano, durante lo studio possono essere rilevati molti altri agenti patogeni di malattie infettive.
2. Elevata sensibilità: oltre a determinare la presenza del virus, il metodo ne determina il tipo e altre caratteristiche.
3. Efficacia: identifica in modo affidabile l'infezione richiesta.
4. Velocità: i risultati del test sono disponibili entro 24 ore dall'esecuzione del test.

Preparazione per l'analisi:

• Si consiglia di interrompere l'assunzione della pillola anticoncezionale una settimana prima del test programmato, poiché potrebbe interferire con i risultati.
• Lo studio non viene eseguito durante le mestruazioni e nei 3 giorni successivi.
• Si consiglia di evitare rapporti sessuali nei due giorni precedenti l'esame.
• La diagnosi viene eseguita a stomaco vuoto; l'ultimo pasto dovrebbe essere consumato 12 ore prima dell'analisi. È possibile bere acqua.
• Il giorno dell'esecuzione del test HPV PCR, si sconsiglia di eseguire procedure igieniche o di andare in bagno per urinare due ore prima della raccolta del materiale.

I risultati ottenuti devono essere interpretati da un medico. Un titolo indicatore fino a 3 Lg indica una concentrazione insignificante del patogeno, 3-5 Lg indica una concentrazione clinicamente significativa e oltre 5 Lg indica un valore elevato. Normalmente, tutti i titoli quantitativi dovrebbero essere negativi. Tuttavia, risultati negativi non indicano sempre l'assenza della malattia. Questo si osserva spesso in presenza di concentrazioni insignificanti del virus nell'organismo e quando il virus è soppresso dal sistema immunitario.

Nonostante tutti i vantaggi, la PCR presenta diversi svantaggi. L'analisi deve essere eseguita solo in un laboratorio moderno per evitare risultati falsi. È necessario prestare particolare attenzione alla raccolta del materiale. Solo un medico dovrebbe interpretare i risultati, poiché potrebbero verificarsi risultati positivi dopo il trattamento recente di un'infezione.

Raschiamento per il papillomavirus umano

Per rilevare l'infezione genitale da HPV negli uomini, viene eseguito un raschiamento, ovvero un test Digene. Il materiale viene raccolto dal canale uretrale utilizzando uno spazzolino speciale; in alcuni casi, il tessuto viene prelevato dal glande. Prima di sottoporsi al test, è necessario fare una doccia e lavarsi accuratamente. La violazione delle norme igieniche personali influisce negativamente sui risultati del test.

Nelle donne, si esegue un raschiamento della cervice uterina in caso di sospetta displasia, erosione e altri processi patologici causati dall'HPV. Per raccogliere il materiale, il medico rimuove le secrezioni vaginali e inserisce una piccola spazzola nell'organo, ruotandola attorno all'asse del canale cervicale. Dopo tutte le manipolazioni, la spazzola viene inserita in una provetta con un terreno di coltura e inviata al laboratorio.

I materiali ottenuti vengono inviati per la diagnosi differenziale mediante PCR; non viene eseguito lo screening citologico. I risultati sono disponibili 2-3 giorni dopo l'analisi. I dati ottenuti rappresentano informazioni complete sul tipo di virus, sulla sua cancerogenicità e su numerosi altri fattori che influenzano il decorso della malattia. Se i risultati non sono corretti, lo studio viene ripetuto. È necessario ripetere lo screening durante e dopo il trattamento per determinarne l'efficacia.

Striscio per il papillomavirus umano

Se durante una visita ginecologica vengono riscontrate verruche o condilomi nell'area genitale, il medico esegue uno striscio vaginale per la ricerca dell'HPV. Il medico passa uno speciale spazzolino sui tessuti interessati. Lo striscio viene prelevato dal canale cervicale nelle donne e dall'uretra negli uomini. La biopsia ottenuta viene inviata in laboratorio per l'analisi.

In caso di sospetto papillomavirus umano si utilizzano i seguenti tipi di strisci:

• PCR – rileva il DNA dell'infezione. Per eseguire questa analisi, viene prelevato un campione di materiale genetico dall'uretra negli uomini, dalla vagina e dal canale cervicale nelle donne. Possono essere utilizzati anche sperma o urina.
• Il test digene è uno studio del materiale raccolto a livello molecolare. Il test consente di differenziare contemporaneamente due gruppi di infezioni da papilloma virus, uno ad alta e uno a bassa oncogenicità.

Gli studi sopra citati classificano i risultati in 5 tipologie:

1. Assenza di cellule atipiche.
2. Presenza di cellule alterate a causa del processo infiammatorio.
3. Numero minimo di cellule con struttura atipica.
4. Cellule maligne.
5. Un gran numero di cellule oncogene.

Esiste anche una classificazione secondo il sistema Bethesda. Si compone di indicatori di bassi e alti gradi di alterazione. In questo caso, la decodifica dello smear è presentata dai seguenti dati:

• NILM – epitelio normale.
• ASCUS – cellule alterate a causa di displasia, infiammazione, infezioni sessualmente trasmesse o HPV.
• ASC-H: sono state rilevate anomalie nella struttura dell'epitelio squamoso. Questo risultato indica stadi precoci di oncologia o displasia grave.
• LSIL: un piccolo numero di cellule alterate è presente nello striscio. Indica displasia o papillomavirus.
• HSIL: alterazioni significative dell'epitelio. Grave displasia e marcata oncologia. Se questo risultato viene ignorato, il 7% dei pazienti sviluppa una neoplasia maligna entro 3-5 anni.
• L'AGC è un epitelio ghiandolare atipico. Si verifica nel cancro o nella displasia uterina.
• AIS – fasi iniziali dell’oncologia.
• SIL di alto grado: carcinoma a cellule squamose.

La velocità con cui si ottengono i risultati del pap test dipende dal metodo di ricerca scelto. In genere, la decodifica è pronta in 2-3 giorni.

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Anticorpi al papillomavirus umano

Per rilevare gli anticorpi contro l'HPV, è indicato un test immunoenzimatico su sangue. Il principio di questo esame è determinare la presenza di immunoglobuline contro l'agente infettivo. La diagnosi con il metodo ELISA indica la risposta immunitaria dell'organismo al virus. A seconda degli anticorpi rilevati, si distinguono i seguenti stadi della malattia:

• IgM – acuta.
• IgG – periodo cronico o di recupero.
• IgA – recidiva dell’infezione cronica.

I risultati del test anticorpale sono disponibili da 1 a 3 giorni dopo il prelievo. Nell'interpretazione dei risultati, è necessario tenere presente che il papillomavirus umano può essere una traccia indiretta; pertanto, vengono eseguiti test PCR e altri test per accertare la presenza di infezione. Inoltre, il test ELISA non determina il genotipo o il rischio di cancerogenicità del virus.

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