Test del sangue per il virus di Epstein-Barr per gli anticorpi e la PCR: come passare, norme

Con "herpes" siamo abituati a intendere antiestetiche e dolorose eruzioni cutanee con vesciche sul viso, nella zona delle labbra, che successivamente formano croste marroni. Purtroppo, questa è solo una delle forme del virus dell'herpes, che può presentarsi nell'uomo in 8 forme. Quello che comunemente chiamiamo herpes è il virus di tipo 1, o virus herpes simplex. Il virus di tipo 2 causa l'herpes genitale, il tipo 3 la "varicella" e l'herpes zoster, il tipo 4 la mononucleosi infettiva e diverse altre patologie piuttosto pericolose, ecc. Questo elenco potrebbe continuare ulteriormente, ma ci concentreremo sul virus dell'herpes di tipo 4, altrimenti noto come virus di Epstein-Barr. Cerchiamo di capire cos'è il virus dell'herpes di tipo 4, perché è pericoloso, quando e perché viene eseguito un test per il virus di Epstein-Barr e cosa indicano i risultati degli esami di laboratorio.

Che cos'è il virus dell'herpes di tipo 4?

L'Herpesvirus di tipo 4, una delle varietà di infezione da herpesvirus, è stato descritto 53 anni fa dal virologo inglese Michael Epstein. Nel suo lavoro sul progetto, il professore è stato assistito dalla sua studentessa laureata Yvonne Barr. È a queste persone che il virus deve il suo nome. Tuttavia, 15 anni dopo la scoperta del virus, il suo nome scientifico è stato cambiato in "herpesvirus umano 4" e un anno fa il virus è stato chiamato "gammavirus umano di tipo 4".

Ma cos'è il virus di Epstein-Barr? Come qualsiasi altro virus, il virione (particella virale) dell'herpesvirus di tipo 4 è costituito da materiale genetico (in questo caso, DNA a doppio filamento) e da un involucro proteico circostante (capside). Inoltre, il virus è circondato da una membrana che gli permette di penetrare facilmente nelle cellule dell'ospite.

Qualsiasi virus è una forma non cellulare, ovvero un fattore infettivo, che non può svilupparsi e riprodursi al di fuori delle cellule di un organismo vivente. L'habitat preferito dell'herpes virus di tipo 4 sono considerate le cellule epiteliali del rinofaringe. Non disdegnano nemmeno i leucociti, preferendo una delle loro varietà, i linfociti B. Sono proprio i linfociti B a partecipare attivamente alla difesa immunitaria dell'organismo. A contatto con un antigene, che nel nostro caso è l'herpes virus di tipo 4 (o meglio i suoi antigeni), i linfociti B producono anticorpi (proteine immunoglobuliniche). Possono essere rilevati nel sangue del paziente eseguendo un'analisi per il virus di Epstein-Barr (EBV).

Il virus dell'herpes di tipo 4 ha 4 antigeni che compaiono in una sequenza strettamente definita:

• L'EA è un antigene precoce che appare nella fase iniziale della malattia, quando le particelle virali sono nella fase di sintesi (infezione acuta primaria o riattivazione di un virus latente quando l'immunità è ridotta),
• Il VCA è un antigene capside che è contenuto nel guscio proteico e appartiene anche a quelli precoci, perché clinicamente la malattia potrebbe non manifestarsi nemmeno in questo periodo,
• MA – antigene di membrana, appare quando il virione è già stato formato,
• L'EBNA (antigene nucleare o polipeptidico) è uno degli antigeni tardivi, i cui anticorpi possono essere rilevati anche diversi mesi dopo la malattia e permangono nel sangue per tutta la vita.

L'herpes virus di tipo 4 è molto insidioso. Poiché il virus è inattivo al di fuori di un organismo vivente, può essere contratto solo dalla persona che è la fonte dell'infezione. E non è affatto necessario che la persona infetta presenti tutti i sintomi della malattia; l'infezione può essere latente, mascherata da semplice affaticamento. Ad esempio, la sindrome da stanchezza cronica è nella maggior parte dei casi associata al virus di Epstein-Barr.

Singoli virioni si trovano nel sangue, nella saliva, nello sperma, nelle secrezioni vaginali e nei tessuti di vari organi. Le particelle virali, insieme alla saliva e al sangue, possono penetrare negli oggetti che ci circondano, dove rimangono inattive finché non penetrano in qualche modo nel corpo umano. Nella stragrande maggioranza dei casi, l'infezione avviene tramite goccioline trasportate dall'aria o per contatto (tramite bacio). Ma sono possibili anche la trasmissione intrauterina del virus dalla madre al feto, l'infezione durante una trasfusione di sangue (se il sangue del donatore conteneva virioni virali) e il contatto sessuale.

Dopo essere entrata nell'organismo e aver penetrato le strutture cellulari, possono essere necessari dai 5 ai 50 giorni prima che la malattia si manifesti. Ma potrebbe anche non manifestarsi, procedendo in forma latente, come accade nella maggior parte dei casi.

Sì, secondo la ricerca, circa il 90% della popolazione adulta ha avuto un'infezione da herpes associata all'EBV almeno una volta nella vita. La maggior parte delle persone non lo sa nemmeno, perché il loro organismo è in grado di combattere l'attacco virale. Ma non è sempre così.

Come si manifesta il virus di Epstein-Barr?

Nella maggior parte dei casi, i medici devono occuparsi dei seguenti tipi di infezione da herpesvirus di tipo 4 nella loro pratica clinica:

• Forma cronica (si manifesta dopo la fase acuta della malattia, presenta alcuni sintomi generali di cattiva salute),
• Forma latente o nascosta (non si manifestano sintomi, ma il virus rimane attivo e viene rilasciato nell'ambiente),
• Forma lenta (meno comune, i sintomi si manifestano uno alla volta nell'arco di un lungo periodo, terminando con la morte del paziente).

Le persone contraggono per la prima volta l'infezione dal virus di Epstein-Barr principalmente durante l'infanzia e l'adolescenza. Il picco di incidenza si verifica tra i 14 e i 18 anni.

L'infezione virale primaria si presenta in 3 forme diverse:

• asintomatico (nessuna manifestazione clinica),
• respiratorio (sintomi di infezione respiratoria: febbre, secrezione nasale, debolezza generale, ecc.),
• Mononucleosi infettiva con una triade di sintomi principali: febbre alta, segni di mal di gola con croste giallastre sulle tonsille, ingrossamento di organi come fegato e milza; si nota un aumento del numero dei leucociti e ingrossamento dei linfonodi.

Esistono diverse possibilità per uscire dalla fase acuta della malattia:

• recupero completo,
• i sintomi della malattia scompaiono, ma il virus rimane nel corpo e si sviluppa, anche se non provoca più cambiamenti evidenti nelle cellule (stato di portatore),
• non ci sono sintomi della malattia, il virus non abbandona il corpo, ma mostra anche poca attività (forma latente),
• riattivazione del virus da una forma latente,
• decorso cronico dell'infezione (con ricadute della malattia, forma cronica attiva, generalizzata con danni agli organi e agli apparati).

Le conseguenze di una lunga permanenza del virus nell'organismo possono essere:

• Forma cronica di mononucleosi infettiva.
• Sindrome ematofagocitica: febbre stabile, diminuzione dei componenti del sangue (aumento della coagulabilità), ingrossamento del fegato e della milza, sanguinamento delle mucose, ittero (dovuto a disfunzione epatica), ingrossamento dei linfonodi, sintomi neurologici.
• Forma latente con sviluppo di immunodeficienza secondaria: ipertermia per un lungo periodo, debolezza generale, ingrossamento e dolorabilità dei linfonodi, dolori muscolari e articolari, frequenti malattie infettive.
• Sviluppo di patologie autoimmuni come il lupus eritematoso, l'artrite reumatoide, ecc.
• Manifestazioni della sindrome da stanchezza cronica con deterioramento del benessere generale e delle prestazioni.
• Forma generalizzata di infezione cronica con danni al sistema nervoso centrale, al miocardio cardiaco, ai reni, al fegato e ai polmoni.
• Sviluppo di malattie oncologiche (leucemia linfoblastica e linfomi), in cui si osserva un aumento patologico del numero di cellule del sistema linfatico. L'herpes virus di tipo 4 non distrugge le cellule portatrici, ma le costringe a moltiplicarsi attivamente, con conseguente rilevamento di neoplasie del tessuto linfoide.

Come possiamo vedere, il virus di Epstein-Barr non è così innocuo come sembra a prima vista, il che significa che non dovrebbe essere trattato con negligenza. Inoltre, l'herpes virus di tipo 4 è caratterizzato da frequenti episodi di trasmissione del virus e di forma latente, per non parlare di varie forme di infezione cronica, in cui una persona rimane una fonte di infezione senza nemmeno sospettarlo.

In questo caso, la presenza di un agente infettivo nell'organismo può essere determinata solo tramite un'analisi speciale per il virus di Epstein-Barr, il cui biomateriale è solitamente il sangue.

Indicazioni per la procedura Test per il virus di Epstein-Barr.

Poiché l'infezione da herpesvirus di tipo 4 a volte non è così facile da rilevare, non sempre viene sospettata. Tuttavia, ci sono alcuni segnali che possono aiutare il medico a sospettare la presenza del virus nell'organismo:

• sistema immunitario gravemente indebolito (a rischio sono i pazienti con infezione da HIV e AIDS, i pazienti dopo trapianto di organi o chemioterapia),
• ingrossamento dei linfonodi regionali nella regione del mento e occipitale della testa e loro dolorabilità, soprattutto se osservato dopo una trasfusione di sangue o un trapianto di organi da un donatore.
• infezione virale respiratoria acuta (ARVI), che si manifesta in presenza di temperature molto elevate (38-40 gradi),
• la comparsa di segni di mononucleosi infettiva, che si verifica più spesso sotto l'influenza del virus di Epstein-Barr.

Anche se una persona non presenta i sintomi sopra menzionati, uno specialista può avere sospetti sulla base di alcuni risultati di esami di routine (analisi del sangue generali e biochimica), nonché di studi sullo stato immunitario.

Un emocromo completo per il virus di Epstein-Barr può mostrare:

• aumento del numero dei linfociti,
• emoglobina bassa, che indica una diminuzione del livello di globuli rossi,
• aumento della coagulazione del sangue dovuto all'elevato numero di piastrine,
• la comparsa di virociti (linfociti atipici con struttura simile ai monociti).

Un esame biochimico del sangue, che fornisce informazioni sullo stato degli organi interni, mostrerà cambiamenti nel funzionamento del fegato e della milza.

Un immunoassay per l'EBV può mostrare una variazione nel numero di linfociti specifici, una discrepanza nel numero di immunoglobuline di classi diverse (disimmunoglobulinemia) e una carenza di immunoglobulina G, che indica un sistema immunitario debole e la sua incapacità di contenere l'assalto del virus.

Tali risultati di analisi non specifiche possono allertare i medici, ma è ancora impossibile stabilire con esattezza di cosa si tratti. Tutto rimarrà allo stadio di ipotesi e diagnosi preliminare. Nella maggior parte dei casi, i medici sospettano una forma latente di mononucleosi infettiva, sebbene altre patologie virali (influenza, epatite, ecc.) possano manifestarsi allo stesso modo.

A causa dell'elevata prevalenza dell'epatite di tipo 4 e della possibilità di trasmissione da madre a figlio, il test del virus di Epstein-Barr sarà utile anche per pianificare una gravidanza. Se la madre ha già contratto l'infezione, il suo organismo ha sviluppato anticorpi. La reinfezione è solitamente esclusa grazie alla formazione di una forte immunità e, se si verifica, non avrà più le conseguenze possibili con il primo contatto con il virus. L'immunità limiterà l'attività del virus per tutta la vita, sebbene il virus stesso rimanga all'interno dell'organismo, come qualsiasi virus herpes.

Se la futura mamma contrae il virus dell'herpes durante la gravidanza, ciò può portare ad aborti spontanei e parti prematuri, oppure il virus può influire negativamente sullo sviluppo intrauterino del bambino.

Un oncologo può prescrivere un test per l'EBV in caso di sospetto linfoma di Burkett o per diagnosticare processi tumorali nelle persone con HIV. Un terapeuta può utilizzare questo test per diagnosticare le infezioni da herpes (diagnosi differenziale per determinare il tipo di virus). A volte il test viene utilizzato anche per valutare l'efficacia del trattamento.

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Preparazione

A seconda del tipo di ricerca, il biomateriale utilizzato può essere sangue, saliva, urina, espettorato, campione di liquido amniotico, raschiamento prelevato dal canale cervicale o dall'uretra, liquido cerebrospinale (CSF). Il più delle volte, i medici ricorrono all'esame del sangue, considerato il più informativo.

È chiaro che alcuni fattori possono influenzare negativamente la qualità e la quantità del biomateriale, per questo è opportuno seguire alcune regole il giorno prima:

• Si raccomanda di eseguire qualsiasi esame (in particolare gli esami del sangue) al mattino a stomaco vuoto. L'ultimo pasto non dovrebbe essere più tardi di 12 ore prima del prelievo di sangue, quindi è meglio bere acqua a cena.
• Il materiale più accettabile per l'analisi del virus di Epstein-Barr è considerato il sangue venoso e prima di donare il sangue da una vena, si raccomanda sempre un riposo di 15 minuti se una persona è appena arrivata in laboratorio,
• Per garantire che il prelievo del sangue avvenga senza conseguenze e che i risultati del test siano affidabili, si raccomanda di non svolgere attività fisica attiva o praticare sport, bere alcolici o fumare nelle 12 ore precedenti la procedura.
• I risultati degli esami possono anche essere influenzati dai farmaci che stai assumendo. Dovresti interrompere l'assunzione di farmaci almeno 2 giorni prima dell'esame. Se ciò non fosse possibile, devi informare l'infermiere di laboratorio dei farmaci che stai assumendo.
• Durante la gravidanza, prima di effettuare il test per l'EBV, viene eseguito un test per la toxoplasmosi per escludere una reazione falsa positiva.
• Se si esegue un esame del sangue per il virus di Epstein-Barr su un bambino di età inferiore ai 5 anni, mezz'ora prima della procedura si deve far bere al bambino molta acqua bollita in porzioni relativamente piccole.

Se si preleva un altro biomateriale per l'analisi, è necessario chiarire in anticipo con il proprio medico tutte le sfumature della preparazione all'analisi, a seconda del materiale utilizzato.

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Tecnica Test per il virus di Epstein-Barr.

I medici attribuiscono un ruolo importante nella diagnosi dell'herpes di tipo 4 e della mononucleosi infettiva a test specifici che aiutano a identificare il DNA del virus o anticorpi specifici nel materiale biologico del paziente. I principali tipi di test di laboratorio utilizzati per rilevare il virus di Epstein-Barr nell'organismo umano includono il test immunoenzimatico (ELISA) e la PCR. Diamo un'occhiata più da vicino all'essenza di entrambi i metodi e alle caratteristiche della loro implementazione.

Immunoanalisi enzimatica dell'EBV

L'ELISA è un esame (analisi) del sangue venoso dei pazienti per la ricerca di anticorpi contro il virus di Epstein-Barr. A seguito della diagnosi, nel sangue dei pazienti con EBV vengono rilevate immunoglobuline di tipo IgG o IgM (ce ne sono 5 in totale) contro uno dei 3 antigeni del virus (precoce, capside o nucleare).

L'analisi viene eseguita in un laboratorio immunologico, dove vengono prelevati circa 10 ml di sangue dalla vena del paziente. Il biomateriale viene poi lasciato a temperatura ambiente per un quarto d'ora, durante il quale il sangue coagula. Il coagulo viene accuratamente separato dalla parte liquida. La parte liquida viene centrifugata e si ottiene siero sanguigno puro. È questo che viene sottoposto a ulteriori analisi.

L'idea del metodo è nata sulla base dei dati secondo cui il nostro corpo produce anticorpi specifici per ogni tipo di virus e batterio che penetrano nell'organismo dall'esterno. Il corpo li riconosce come estranei e li distrugge con l'aiuto di anticorpi specifici che aderiscono saldamente all'antigene.

L'essenza dell'analisi ELISA si basa su questa reazione. Gli anticorpi con i tag attaccati si combinano con gli antigeni. Ai tag viene applicata una sostanza che, reagendo con uno speciale enzima, modifica il colore del campione. Maggiore è il numero di tali "catene", più intenso è il colore del biomateriale.

L'immunoanalisi enzimatica può essere eseguita utilizzando tre metodi:

• ELISA diretto. Il liquido di prova viene posto nei pozzetti e lasciato agire per circa mezz'ora in modo che gli antigeni possano aderire alle pareti. Agli antigeni adsorbiti viene aggiunto un liquido con anticorpi marcati. Dopo il tempo richiesto (da mezz'ora a 5 ore), quando gli anticorpi sono stati rilevati e legati agli antigeni, il liquido viene drenato, i pozzetti vengono accuratamente lavati e l'enzima viene aggiunto. La concentrazione del virus in un'unità di sangue viene determinata utilizzando il metodo di colorazione.
• ELISA indiretto. In questo metodo, il siero sanguigno in esame e gli anticorpi marcati vengono aggiunti agli antigeni adsorbiti sulla superficie dei pozzetti. Come risultato, si ottengono 2 tipi di legamenti, alcuni dei quali marcati. Il risultato dipende dalla concentrazione di antigeni nel campione in esame. Maggiore è il numero di anticorpi non marcati, minore è il numero di composti marcati dall'enzima.

Successivamente, alla composizione lavata viene aggiunto uno speciale reagente, che serve a determinare l'attività enzimatica dei complessi antigene-anticorpo.

• "Sandwich". Differisce dal metodo indiretto in quanto inizialmente non vengono assorbiti gli antigeni, ma gli anticorpi sulla superficie. A questi viene aggiunta una soluzione contenente gli antigeni in esame. Dopo aver lavato il carrier, vengono aggiunti anticorpi marcati con enzimi. Gli anticorpi in eccesso vengono nuovamente rimossi e, utilizzando perossido di idrogeno, si ottiene una sostanza colorata, che viene studiata con un metodo spettrometrico.

Questo tipo di analisi consente non solo di identificare anticorpi specifici e di determinarne la concentrazione, ma anche di chiarire lo stadio della malattia. Infatti, diversi antigeni del virus di Epstein-Barr compaiono in fasi diverse dell'infezione da herpes, il che significa che gli anticorpi contro di essi vengono prodotti in un determinato periodo della malattia.

Pertanto, gli anticorpi IgG contro l'antigene precoce (IgG EA) compaiono nel sangue 1-2 settimane dopo l'infezione, quando la malattia è in fase acuta o in fase di riattivazione del virus. Le immunoglobuline di questo tipo scompaiono dopo 3-6 mesi. Nel decorso cronico di un'infezione virale, tali anticorpi sono particolarmente numerosi e, nella forma atipica, sono del tutto assenti.

Anche gli anticorpi IgG contro l'antigene del capside (IgG VCA) compaiono precocemente, durante le prime 4 settimane di malattia, ma il loro numero massimo è determinato dal secondo mese di infezione. Nella fase acuta, sono presenti nella maggior parte dei pazienti, ma potrebbero non comparire nei bambini. Nel decorso cronico della malattia, soprattutto durante i periodi di riattivazione del virus, la quantità di IgG VCA è particolarmente elevata. Questi anticorpi rimangono nel sangue umano per sempre, come il virus stesso, il che indica l'immunità acquisita all'agente infettivo.

Gli anticorpi IgM contro l'antigene del capside (IgM VCA) possono comparire anche prima dei primi segni della malattia. La loro concentrazione (titolo) è particolarmente elevata nelle prime 6 settimane di malattia. Questo tipo di anticorpo è caratteristico dell'infezione acuta e della riattivazione dell'infezione cronica. Gli anticorpi IgM VCA scompaiono dopo 1-6 mesi.

Gli anticorpi IgG contro il gene nucleare (IgG EBNA) possono indicare che una persona ha precedentemente contratto direttamente un'infezione da herpes. Nella fase acuta della malattia, vengono rilevati estremamente raramente, di solito durante la fase di guarigione (tra il 3° e il 10° mese). Possono essere rilevati nel sangue diversi anni dopo l'infezione.

La rilevazione di singoli antigeni non fornisce un quadro completo della malattia, pertanto è necessario eseguire contemporaneamente i test per i diversi anticorpi. Ad esempio, se sono presenti solo IgM VCA e non vengono rilevate IgG EBNA, si tratta di un'infezione primaria.

Purtroppo, l'immunoanalisi enzimatica è spesso insufficiente per rilevare un'infezione primaria da herpes o una patologia congenita. In quest'ultimo caso, gli anticorpi potrebbero non essere rilevati affatto. Come test di conferma per la malattia primaria, viene utilizzato uno studio molecolare del sangue o di altro materiale biologico per il virus di Epstein-Barr.

Analisi PRC per il virus di Epstein-Barr

Questa analisi viene effettuata nella fase dell'infezione primaria acuta, altrimenti il risultato sarà errato.

L'essenza del metodo PCR (reazione a catena polidimensionale) risiede nel fatto che ogni agente infettivo possiede un proprio set di geni contenuti in una molecola di DNA. Il DNA del patogeno è presente nel biomateriale prelevato per la ricerca in piccole quantità (i virus stessi hanno dimensioni microscopiche), quindi è molto difficile valutare la situazione. Ma se viene eseguita una reazione specifica, la quantità di materiale genetico aumenterà significativamente, il che renderà possibile identificare il patogeno.

Utilizzando strumenti monouso, il materiale viene prelevato per la ricerca molecolare e inserito in un apposito dispositivo per l'analisi. Il dispositivo è un termostato con un programma specifico: un termociclatore o amplificatore. Il dispositivo esegue un ciclo completo di PRC diverse decine di volte (circa 2-3 minuti), che si compone di 3 fasi:

• Denaturazione (a una temperatura di 95 gradi, i filamenti di DNA vengono separati).
• Ricottura (a una temperatura di 75 gradi, vengono introdotti nel materiale in studio “primer” appositamente preparati per l’EBV, che si legano al DNA del virus).
• Estensione o moltiplicazione del materiale genetico (al seme viene aggiunto uno speciale enzima a una temperatura di 72 gradi, che ricrea una nuova catena di DNA, raddoppiando così la quantità di materiale genetico).

Se il ciclo completo della reazione polidimensionale viene ripetuto 50 volte, la quantità di materiale aumenterà di 100 volte. Ciò significa che sarà molto più facile identificare il patogeno.

Test del virus di Epstein-Barr per un bambino

Come già sappiamo, il virus di Epstein-Barr può causare lo sviluppo di molte malattie. Una volta entrato nel corpo umano, vi rimane residente permanente e solo il lavoro ben coordinato del sistema immunitario gli impedisce di parassitare attivamente le cellule.

Quasi il 95% della popolazione adulta mondiale vive con l'EBV in casa, e la maggior parte di loro ha familiarizzato con il virus nella prima infanzia. Alcuni lo hanno ereditato dalla madre, mentre altri lo hanno contratto da genitori e parenti che si sono precipitati a baciare il bambino, o tramite goccioline trasportate dall'aria all'asilo o a scuola (in quei luoghi le malattie infettive assumono solitamente proporzioni "universali").

I bambini piccoli tendono generalmente a mettere tutto in bocca e la maggior parte dei virioni si trova nella saliva. E se diversi bambini leccano lo stesso giocattolo all'asilo mentre le maestre sono impegnate nelle loro faccende, non sorprende che il virus si diffonda così attivamente in grandi gruppi di bambini.

L'EBV può essere facilmente definito una malattia infantile e giovanile, poiché durante l'adolescenza, metà dei bambini ha già il virus nell'organismo (e, a 30 anni, circa il 90% degli adulti). I bambini di diverse età si ammalano a modo loro. Fino a un anno, quando il bambino non comunica attivamente con le persone, la probabilità che si ammali è bassa. Un bambino di età superiore a un anno, anche se non ha frequentato l'asilo, diventa più socievole, gioca con i coetanei per strada, fa shopping con la madre, ecc., e la probabilità di contrarre il virus aumenta notevolmente.

Ma questo non è un motivo valido per rinchiudere il bambino tra quattro mura. All'età di 1-3 anni, la malattia nella stragrande maggioranza dei casi si manifesta senza sintomi, tranne forse un leggero aumento della temperatura e un leggero raffreddore, che ricorda un raffreddore. A quanto pare, prima il bambino si familiarizza con il virus, più facilmente procede tale conoscenza.

Non è positivo che un bambino si ammali senza la presenza di anticorpi IgG VCA nel sangue, il che potrebbe indicare che non si è ancora formata l'immunità al virus, e che la riattivazione del virus è possibile non appena il sistema immunitario si indebolisce. La causa è molto probabilmente l'imperfezione del sistema immunitario dei bambini piccoli, in fase di formazione da diversi anni.

La vita scolastica offre ancora più prerequisiti per la malattia, soprattutto nell'adolescenza, quando i giovani praticano attivamente il bacio. Ma nei bambini di età superiore ai 3 anni, la malattia è meno frequentemente asintomatica. Nella maggior parte dei casi, i medici riscontrano la mononucleosi infettiva con i suoi sintomi caratteristici.

Nonostante la patologia possa avere un decorso lungo (circa 2 mesi), non è così pericolosa e non richiede l'uso di farmaci seri. I medici prescrivono farmaci antinfiammatori e antivirali e, in caso di infezione batterica, si ricorre agli antibiotici. A proposito, le penicilline sono sconsigliate in questo caso perché possono provocare la comparsa di un'eruzione cutanea.

Non pensate che se un bambino o un adolescente contrae la mononucleosi infettiva, significhi che il virus di Epstein-Barr si sia insediato nel suo organismo. La malattia ha altri patogeni meno comuni, come il citomegalovirus (herpes virus di tipo 5). Per capire di cosa si tratta, i medici prescrivono un test per il virus di Epstein-Barr e, se necessario, altri esami di laboratorio.

È anche vero che la mononucleosi infettiva non è l'unica manifestazione dell'EBV nell'infanzia. Esistono altre malattie associate a questo patogeno, ma nella nostra regione sono rare.

Pertanto, il linfoma di Burkitt (che è la causa della diagnosi di EBV) si riscontra principalmente nei bambini dei paesi africani, molto raramente in America e ancora più raramente in Europa (e solo in concomitanza con l'AIDS). Un tumore alla mandibola con danni ai linfonodi, ai reni e ad altri organi si riscontra nei bambini di età compresa tra 3 e 8 anni.

Il cancro nasofaringeo, una parte significativa di altri linfomi, la leucoplachia villosa della bocca: sono tutte manifestazioni dell'EBV sullo sfondo di una forte riduzione dell'immunità, che si verifica con l'infezione da HIV e nella sua fase avanzata, l'AIDS.

L'immunodeficienza congenita e la presenza del virus di Epstein-Barr costituiscono una pericolosa combinazione che può portare allo sviluppo di una sindrome proliferativa in un bambino. In questo caso, un aumento del numero di linfociti B porta alla comparsa di granuli in molti organi, impedendone il normale funzionamento. Si tratta di una malattia con un alto tasso di mortalità, ma che non si sviluppa in presenza di un sistema immunitario normale.

Si può affermare che durante l'infanzia il virus di Epstein-Barr sia pericoloso principalmente in caso di immunodeficienza a causa dello sviluppo di varie complicazioni. Nella maggior parte dei casi, si limita alla mononucleosi infettiva. E sebbene non richieda un trattamento specifico, i medici preferiscono comunque accertare la natura dell'agente patogeno, prescrivendo al bambino un esame del sangue generale, un test immunoenzimatico e una PCR.

Poiché l'infezione primaria avviene prevalentemente durante l'infanzia, è possibile limitarsi a un emocromo completo e a una PCR, che forniscono informazioni utili quando la malattia viene diagnosticata per la prima volta.

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Prestazione normale

I risultati dell'analisi PCR vengono elaborati mediante elettroforesi o utilizzando "primer" marcati. In quest'ultimo caso, è sufficiente aggiungere un reagente (cromogeno) e determinare, in base al colore, la presenza di virioni nel campione. Un risultato positivo all'elettroforesi è indicato dalla rilevazione di filamenti di DNA di diversa lunghezza nel campione in esame.

Durante il periodo di incubazione della malattia e la presenza asintomatica del virus, la PCR darà un risultato negativo, così come in caso di assoluta assenza del virus nell'organismo. All'inizio dello sviluppo dell'infezione primaria e nelle sue fasi iniziali, la PCR in tempo reale può dare risultati sia positivi che negativi, il che non chiarisce in alcun modo la situazione.

Tuttavia, nel corso della malattia (fase acuta), nel suo decorso cronico o in caso di riattivazione del virus (esacerbazione) e in caso di forme atipiche, l'analisi risulterà positiva. Se una persona è malata da molto tempo e il virus nel suo organismo è in uno stato inattivo, l'analisi PCR darà un risultato negativo, il che significa che eseguire questa analisi in questo periodo è inappropriato, così come nelle fasi troppo precoci della malattia.

Va detto che risultati accurati di questo tipo di ricerca di laboratorio sono possibili solo in caso di infezione primaria e in assenza di virioni di altri virus.

Ora, per quanto riguarda l'immunoanalisi enzimatica per il virus di Epstein-Barr, i requisiti sono gli stessi. La presenza nell'organismo di herpes virus di tipo 5 o 6, toxoplasmosi e infezione da HIV può alterare il risultato non meno di una scarsa attenzione all'analisi o di una scarsa qualità dei reagenti utilizzati. In questo caso, potrebbero essere necessari ulteriori studi, tenendo conto dei possibili agenti patogeni.

I risultati normali dei test, che indicano l'assenza del virus nell'organismo, sono considerati negativi per tutti e 4 i test: IgG EA, IgM VCA, IgG VCA e IgG EBNA. Sì, ogni test viene eseguito separatamente, poiché gli antigeni compaiono in periodi diversi della malattia. A volte possono essere prescritti solo test individuali, ma nella maggior parte dei casi è necessario eseguire tutti e 4 i test, ma in periodi diversi della malattia.

Ad esempio, durante il periodo di incubazione della malattia, così come in assenza di infezione, nessuno dei 4 tipi di anticorpi viene rilevato nel sangue. Un tale risultato non può essere considerato sufficiente, perché non consente di distinguere una persona che si è ammalata per la prima volta da una persona sana.

All'inizio dello sviluppo della malattia primaria, nel sangue sono presenti solo anticorpi IgM anti-VCA. Nelle fasi iniziali della malattia, a questi si aggiungono anche gli anticorpi IgG anti-VCA.

La fase acuta dell'infezione primaria procede con la formazione di tre tipi di anticorpi: IgG VCA, IgM VCA e IgG EA, con il maggior numero di anticorpi IgG contro l'antigene capsidico rilevato. La stessa composizione anticorpale si mantiene per sei mesi dopo la fase acuta della malattia, ma la quantità di IgM VCA diminuisce gradualmente fino a zero.

Sei mesi dopo la malattia, nel sangue compaiono gli anticorpi IgG EBNA, mentre le immunoglobuline IgG EA diminuiscono sempre di più e le IgM VCA sono del tutto assenti.

Nei casi cronici della malattia o di riattivazione del virus, possono esserci diversi indicatori. Il più delle volte, tutti e 4 i tipi di anticorpi sono presenti nel sangue. Ma è anche possibile che le immunoglobuline IgM VCA e IgG EBNA non vengano rilevate.

La complicazione dell'infezione virale da parte di processi tumorali si verifica in assenza di anticorpi IgM VCA e le immunoglobuline IgG EBNA non vengono rilevate in tutti i casi.

Ma l'immunoanalisi enzimatica determina non solo la presenza di determinati anticorpi, ma anche la loro concentrazione, il che ci consente di valutare con maggiore precisione lo stadio della patologia e le sue possibili conseguenze. Non c'è bisogno di parlare di cifre specifiche qui. Dopotutto, ogni laboratorio esegue l'analisi in uno dei modi possibili, utilizzando reagenti diversi, quindi i risultati delle analisi di diversi laboratori possono differire in formato digitale.

Al paziente viene consegnato un modulo che indica i valori soglia (di riferimento). Se il risultato è inferiore alla soglia, è considerato un indicatore normale (negativo). Se il numero determinato è superiore al valore di riferimento, tutto indica un risultato positivo, il che significa che il virus è vivo nell'organismo. Il valore del valore determinato indica lo stadio della malattia e la colonizzazione dell'organismo con i virioni EBV, ovvero la gravità della patologia.

Se il test ELISA è negativo, significa semplicemente che la persona non ha avuto contatti con l'EBV in passato. Tuttavia, è impossibile stabilire con certezza se il virus sia attualmente presente nell'organismo. Un risultato negativo può essere causato dall'incubazione del patogeno nell'organismo e dalla presenza asintomatica del virus. Talvolta, per assicurarsi che l'organismo non sia infettato dal virus, è necessario eseguire una seconda serie di test a distanza di tempo.

Se il risultato del test ELISA per il virus di Epstein-Barr supera solo di poco i valori di riferimento, il risultato è considerato dubbio. La causa è spesso lo stadio iniziale della malattia o la presenza di virioni di un altro virus nell'organismo. In questo caso, dopo 2 settimane, si raccomanda di ripetere il test per l'EBV ed eventualmente per altri patogeni.

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Per quanto riguarda la durata del test per il virus di Epstein-Barr e i tempi di attesa per i risultati, non ci sono particolari difficoltà da aspettarsi. In un laboratorio serio e ben attrezzato, non si dovranno attendere più di 2 giorni dopo la consegna del materiale biologico. In situazioni che richiedono analisi urgenti, la risposta può essere ottenuta anche dopo un paio d'ore.

Il test per il virus di Epstein-Barr dovrebbe essere eseguito in un laboratorio affidabile, dove siano disponibili reagenti di alta qualità e specialisti qualificati. Dopotutto, il test è costoso (e non poco, il test per un tipo di anticorpo costa circa 150-170 UAH), e non vorrei ottenere un risultato falso e poi dover contattare nuovamente un altro laboratorio per ripetere il test.

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