Esame microbiologico dell'espettorato

L'esame microbiologico è il tassello più importante nella ricerca diagnostica e nella verifica dell'agente eziologico della polmonite. Non si limita a isolare l'agente eziologico, ma ne studia anche le proprietà, inclusa la sensibilità a diversi farmaci ad azione battericida e batteriostatica.

A tale scopo, viene utilizzato il metodo della semina dell'espettorato su diversi terreni nutritivi. Da un campione di espettorato consegnato al laboratorio, i grumi purulenti vengono selezionati e accuratamente lavati in una piastra Petri con una soluzione isotopica di cloruro di sodio, che consente in una certa misura di liberarli dalla microflora delle vie respiratorie superiori. La semina dei grumi purulenti dell'espettorato viene effettuata su diversi terreni nutritivi, la cui composizione è descritta in manuali specifici di microbiologia. I terreni con le semine vengono incubati a 37,5 °C per 24 ore. Dalle colonie cresciute vengono isolate colture pure, identificate con metodi microbiologici noti e ne viene determinata la sensibilità agli antibiotici.

Per determinare il contenuto quantitativo di microrganismi, l'espettorato viene omogeneizzato, miscelato con brodo nutritivo e dalla miscela vengono preparate successive diluizioni decuple, che vengono inoculate su piastre Petri con agar sangue. Dopo 24 ore di incubazione a 37,5 °C, i risultati vengono considerati, contando le colonie dello stesso tipo nell'aspetto e tenendo conto del grado di diluizione del materiale. Dalle colonie vengono preparati degli strisci che vengono esaminati al microscopio.

Interpretazione dei risultati

L'interpretazione dei risultati dell'esame microbiologico dell'espettorato è piuttosto complessa, il che è spiegato da una serie di fattori. È già stato accennato in precedenza alla costante contaminazione del contenuto bronchiale con la microflora delle vie respiratorie superiori e della cavità orale e alla frequente presenza nel normale contenuto tracheobronchiale di persone sane della maggior parte degli agenti causali più tipici delle malattie respiratorie (pneumococchi, streptococchi, stafilococchi, ecc.). A questo proposito, l'isolamento nell'espettorato durante le indagini microbiologiche di un'associazione di vari microrganismi, la maggior parte dei quali in questo caso specifico è opportunistica, rende estremamente difficile stabilire l'agente causale della malattia. Pertanto, per interpretare i risultati dell'esame microbiologico dell'espettorato, è necessario tenere conto della predominanza quantitativa di un particolare tipo di batteri (oltre 10 ⁶ -10 ⁷ mc/ml), della comparsa di determinati microrganismi nella fase di esacerbazione e della loro scomparsa durante il periodo di remissione. È molto importante tenere in considerazione il quadro clinico della malattia.

I principali e possibili agenti causali delle varie forme cliniche di polmonite

Forma clinica della polmonite	Principali agenti patogeni	Possibili agenti patogeni
Croupous	Pneumococchi	Streptococchi, Klebsiella
Post-influenza	Stafilococchi, pneumococchi, klebsiella	Haemophilus influenzae, streptococchi
Ascesso	Stafilococchi, batterioidi, flora mista	Klebsiella, Pseudomonas aeruginosa
Aspirazione	Bacteroides, streptococchi anaerobici	Stafilococchi, pneumococchi
Postoperatorio	Stafilococchi	Pneumococchi, Klebsiella
Interstiziale	Micoplasmi	Patogeni dell'ornitosi, della psittacosi
Polmonite secondaria in pazienti ospedalizzati senza precedente terapia antibatterica	Stafilococchi, pneumococchi, klebsiella, batterioidi	Escherichia coli, serratia, ecc.
Polmonite secondaria sviluppatasi sullo sfondo della terapia antibatterica	Microrganismi patogeni facoltativi	Pseudomonas, Serratia, Klebsiella, Staphylococcus, Proteus, ecc.
Nei pazienti con bronchite cronica	Pneumococchi, Haemophilus influenzae	Stafilococchi, streptococchi
Nei pazienti con alcolismo	Pneumococchi, Haemophilus influenzae, Klebsiella	Escherichia coli, protozoi
Nella sindrome da immunodeficienza acquisita	Pneumocystis, funghi	Citomegalovirus
Nei pazienti la cui assistenza è fornita da soggetti esterni	Pneumococchi, stafilococchi, papilla emofilica	Klebsiella, Escherichia coli

Nella valutazione quantitativa dei risultati dello studio della contaminazione microbica nei pazienti con polmonite, è necessario tenere presente l'altissima sensibilità di questo indicatore alla prescrizione di antibiotici. Anche un trattamento a breve termine con farmaci antibatterici può portare a una netta riduzione della contaminazione microbica, il che non consente una valutazione adeguata dei risultati dello studio dell'espettorato. Pertanto, è consigliabile raccogliere l'espettorato prima di prescrivere un trattamento antibiotico.

Va inoltre notato che per la coltivazione di patogeni intracellulari della polmonite (micoplasma, legionella, clamidia, rickettsia) vengono utilizzati terreni nutritivi selettivi speciali. I test microbiologici di routine effettuati su terreni nutritivi convenzionali (agar-agar) non danno mai risultati positivi. Pertanto, la scelta di metodi microbiologici specifici deve essere effettuata con la collaborazione del medico curante, che è tenuto a informare il medico di laboratorio dei propri sospetti riguardo al possibile ruolo dei patogeni intracellulari nell'insorgenza della polmonite in questo paziente.

Va aggiunto che nella pratica clinica reale, anche un esame microbiologico tecnicamente perfetto dell'espettorato consente di identificare il patogeno in non più del 40-60% dei casi. Pertanto, è possibile utilizzare altri metodi di ricerca moderni per verificare l'agente patogeno. Il contenuto informativo di uno studio batteriologico può essere significativamente aumentato utilizzando l'aspirato tracheobronchiale, il fluido ottenuto durante il lavaggio broncoalveolare (BAL), la broncoscopia, ecc., anziché l'espettorato, come materiale biologico in esame.

Inoltre, il metodo dell'immunofluorescenza di vari materiali biologici (materiale broncoscopico, sangue, contenuto pleurico, ecc.), i metodi diagnostici PCR e lo studio del livello di anticorpi specifici nel siero sanguigno possono essere utilizzati per identificare i patogeni della polmonite. Purtroppo, questi metodi diagnostici non hanno ancora trovato ampia applicazione clinica e sono attualmente utilizzati solo in grandi centri e laboratori specializzati.

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