Analisi generale del liquido cerebrospinale

Un'analisi generale del liquido cerebrospinale include il conteggio del numero e della composizione degli elementi figurati del sangue. Normalmente, 1 μl di liquido cerebrospinale contiene 4-6 cellule (linfociti). In caso di processi patologici (infiammazione delle meningi, encefalite, processi volumetrici, insufficienza circolatoria cerebrale acuta), il numero di elementi cellulari aumenta. Nella meningite purulenta, i neutrofili sono presenti in grandi quantità nel liquido cerebrospinale (fino a diverse decine di migliaia in 1 μl), mentre nella meningite sierosa, il numero di cellule aumenta da diverse decine a 1-2 mila a causa dei linfociti. Il rapporto tra neutrofili e linfociti viene calcolato in percentuale (citogramma). Spesso viene rilevato e contato anche il numero di eritrociti. Inoltre, nel liquido cerebrospinale possono essere rilevati eosinofili (nelle malattie parassitarie del sistema nervoso centrale), macrofagi (nei processi infiammatori protratti) e cellule atipiche (nei tumori delle meningi, nella leucemia). Se si sospetta la presenza di cellule atipiche, un citologo esamina uno striscio di liquido cerebrospinale. Il conteggio delle citosi e il citogramma non hanno solo valore diagnostico, ma consentono anche di valutare l'efficacia della terapia antibatterica nella meningite batterica.

Come esami supplementari si utilizzano metodi citochimici che permettono di valutare lo stato funzionale delle cellule del liquido cerebrospinale (determinazione del contenuto di glicogeno e dell'attività della mielopirrossiasi nei neutrofili, attività della fosfatasi alcalina nei linfociti, ecc.).

È auspicabile contare le cellule nel liquido cerebrospinale entro 1-2 ore dalla puntura. In fasi successive, la composizione cellulare può variare significativamente a causa della lisi cellulare, della precipitazione e della formazione di coaguli di fibrina. Poiché gli eritrociti nel liquido cerebrospinale vengono rapidamente lisati, la loro determinazione viene effettuata solo in presenza di sangue fresco nello spazio subaracnoideo: dopo punture traumatiche, emorragie subaracnoidee, emorragie parenchimatose con penetrazione di eritrociti nelle vie del liquido cerebrospinale, in caso di occlusioni trombotiche venose con rigonfiamento delle vene e diffusione secondaria di cellule del sangue attraverso la parete venosa.

Il limite superiore del numero normale di leucociti nel liquido cerebrospinale è di 5 per 1 μl. Tuttavia, alcuni sifilologi ritengono che il limite superiore della norma non sia 5, ma 9 cellule. Una lieve pleiocitosi, fino a 20 per 1 μl, si osserva solitamente dopo pielografia, anestesia spinale e ictus. Alterazioni incomparabilmente più gravi si osservano nelle malattie infettive del sistema nervoso centrale. La meningite batterica acuta è solitamente accompagnata da una pleiocitosi molto più pronunciata rispetto alla meningite asettica. Pertanto, nella maggior parte delle meningiti batteriche si riscontra una pleiocitosi superiore a 1000 per 1 μl; tuttavia, nelle fasi iniziali o in caso di meningite parzialmente trattata (!), la pleiocitosi può essere inferiore. Nella meningite asettica, una pleiocitosi così elevata è rara. Nei casi in cui la pleiocitosi è particolarmente elevata (5.000-10.000 in 1 μl), oltre alla meningite, si può sospettare la rottura di un ascesso intracerebrale o perimeningeo; in questo caso, si osserva solitamente un rapido aumento dei sintomi clinici. Un aumento della concentrazione di leucociti polimorfonucleati si osserva solitamente nella meningite batterica. Un aumento del contenuto linfocitario si osserva solitamente nelle infezioni croniche (meningite tubercolare e fungina), nelle infezioni batteriche non trattate, nelle infezioni virali, nei processi infiammatori non infettivi (ad esempio, esacerbazione della sclerosi multipla). L'eosinofilia è rara e indica elmintiasi, inclusa la cisticercosi, e talvolta si osserva anche nella meningite tubercolare, nei linfomi del sistema nervoso centrale e nella presenza di corpi estranei.

Metodi immunologici

Vengono utilizzati metodi basati sulla determinazione di antigeni e anticorpi patogeni. Il metodo RLA è più comunemente utilizzato per rilevare gli antigeni di meningococco, pneumococco e Haemophilus influenzae di tipo b. Il test immunoenzimatico (ELISA) viene utilizzato per diagnosticare la meningite tubercolare; in caso di sospetta encefalite erpetica, vengono determinati anticorpi specifici nel liquido cerebrospinale.

La reazione a catena della polimerasi (PCR) è ampiamente introdotta nella pratica clinica, poiché consente di identificare la stragrande maggioranza dei patogeni delle neuroinfezioni e, in condizioni pratiche, di stabilire l'eziologia della neuroinfezione nel 90% dei pazienti. I vantaggi del metodo sono l'elevata sensibilità e specificità, la capacità di rilevare frammenti del genoma del patogeno durante il trattamento e di determinarne la carica microbica, se necessario. Per ridurre i costi, si raccomanda di condurre inizialmente una reazione con primer di patogeni comuni (meningococco, pneumococco, Haemophilus influenzae di tipo b, enterovirus) e successivamente con patogeni più rari (batteri Gram-negativi, borrelia, micobatteri della tubercolosi, virus erpetici, virus patogeni delle infezioni infantili da goccioline, ecc.). Il quadro clinico del liquido cerebrospinale dipende dalla tempistica dell'esame e dal trattamento.

L'esame citologico del liquido cerebrospinale consente talvolta l'identificazione di cellule atipiche presenti anche in quantità minime. Si tratta di un metodo piuttosto importante per l'individuazione di lesioni tumorali del sistema nervoso centrale.

I processi infiammatori accompagnati da leucocitosi possono anche presentare determinate caratteristiche citologiche. Pertanto, i linfociti che compaiono nel liquido cerebrospinale in risposta a un'infezione virale possono avere nuclei chiaramente visibili, per cui a volte vengono confusi con cellule maligne. L'encefalite erpetica può essere accompagnata dalla comparsa di grandi inclusioni intranucleari nei linfociti o negli ependimociti; tale riscontro è patognomonico. Nelle infezioni criptococciche, colonie simili a lieviti possono essere rilevate sia allo stato libero che intracellulare nei macrofagi. L'emorragia subaracnoidea porta alla comparsa di macrofagi (eritrofagi) distesi da molteplici vacuoli. I macrofagi sono inizialmente pieni di eritrociti e prodotti lipidici della loro degradazione, e successivamente di emosiderina. In alcune malattie da accumulo, come la malattia di Tay-Sachs, vengono rilevati macrofagi con citoplasma schiumoso pieno di prodotti di degradazione delle cellule gangliari. L'identificazione delle cellule tumorali si basa sulla rilevazione di una serie di segni citologici caratteristici del processo neoplastico. L'affidabilità della diagnosi citologica del tumore è tanto maggiore quanto più numerosi sono i segni neoplastici rilevati. Spesso, gli studi citologici del liquido cerebrospinale vengono utilizzati per diagnosticare danni al sistema nervoso centrale in caso di leucemia acuta e linfomi, che solitamente si diffondono nello spazio subaracnoideo. Per l'immunodiagnostica vengono utilizzati anticorpi specifici contro i linfociti B e T. Pertanto, nei processi infiammatori generali, i linfociti T predominano, mentre nei processi maligni si osserva una proliferazione predominante di cloni patologici di linfociti B. Gli studi immunoistochimici vengono utilizzati per identificare una forma specifica di leucemia. Tuttavia, è opportuno tenere presente che nei casi di leucemia accompagnata dal rilascio di cellule patologiche nel flusso sanguigno, i risultati dell'esame del liquido cerebrospinale possono essere falsi positivi a causa dell'ingresso di queste cellule nel flusso sanguigno. È importante ricordare che l'esame citologico del liquido cerebrospinale è efficace solo nei processi maligni che coinvolgono le meningi. La carcinomatosi delle meningi si verifica più spesso in concomitanza con metastasi di tumori maligni del polmone, della ghiandola mammaria, della cavità addominale e melanoma.

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