Analisi microbiologica del liquido cerebrospinale

Ricerca microbiologica

L'esame microscopico di uno striscio colorato di liquido cerebrospinale consente di identificare la flora microbica nel 10-20% dei pazienti con meningite batterica. Nella meningite batterica, si possono rilevare diplococchi meningo-a forma di fagiolo, situati intracellularmente nel citoplasma dei neutrofili, o pneumococchi, anch'essi diplococchi ma di forma triangolare, e una coppia di cocchi che forma un rombo (ricoperto da una capsula, situato extracellularmente). In alcuni casi, si rilevano visivamente spirochete, batteri a forma di bastoncello e cellule fungine simili a lieviti. I dati ottenuti mediante microscopia sono approssimativi e sono confermati da altri metodi. Il metodo della flottazione viene utilizzato per rilevare il micobatterio tubercolare. Per isolare la coltura del patogeno, il liquido cerebrospinale viene seminato su terreno nutritivo. I risultati dello studio dipendono dalla corretta raccolta e trasporto del liquido cerebrospinale e dalla qualità del terreno nutritivo. La frequenza di isolamento della coltura del patogeno è doppia se il paziente non ha ricevuto farmaci antibatterici prima della puntura spinale. In pratica, è possibile isolare la coltura del patogeno dal liquido cerebrospinale nel 30-50% dei pazienti con meningite purulenta. È obbligatoria la determinazione della sensibilità della coltura isolata ai farmaci antibatterici utilizzati per il trattamento della meningite (benzilpenicillina, ampicillina, oxacillina, ceftriaxone, pefloxacina, ciprofloxacina, vancomicina, rifampicina, gentamicina). Le colture fungine vengono testate per la sensibilità ai farmaci antimicotici.

La regola principale su cui si basano gli studi microbiologici del liquido cerebrospinale è che il numero di colonie coltivate dipende dal numero di microrganismi seminati e dalla loro vitalità al momento della semina. Ciò significa che il volume di liquido cerebrospinale inviato per l'esame microbiologico e la velocità della sua somministrazione influenzano direttamente i risultati dello studio. In caso di infezioni fungine, è necessario inviare volumi di liquido particolarmente elevati per la semina, poiché la concentrazione di microrganismi fungini in esso è estremamente bassa. Pertanto, quando si esamina un paziente con meningite cronica, il volume minimo di liquido cerebrospinale inviato per la semina dovrebbe essere di 15-20 ml. Un'altra regola dell'esame microbiologico è l'obbligo della colorazione di Gram nella meningite batterica acuta. La procedura di colorazione richiede circa 5 minuti e presenta un'elevata sensibilità e specificità. I risultati di questa colorazione consentono la selezione immediata della terapia antibatterica adeguata. Gli antibiotici somministrati prima della puntura lombare possono danneggiare le membrane batteriche e quindi ridurre significativamente la specificità della colorazione di Gram, ma anche in questo caso è utile. Oltre alla coltura, alla colorazione di Gram, alla colorazione per Mycobacterium tuberculosis e alla colorazione a inchiostro di china per criptococchi, vengono utilizzati diversi test sierologici per antigeni virali, batterici e fungini. Pertanto, in caso di sospetto di neurosifilide, è necessario testare il liquido cerebrospinale e il RIF.

Metodi virologici

L'isolamento della coltura virale viene solitamente utilizzato solo per scopi scientifici.

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