Analisi al microscopio dell'espettorato

Osservazione microscopica di campioni di espettorato colorati nativi e fissi permette un esame dettagliato della sua struttura cellulare, e in una certa misura riflette la natura del processo patologico nei polmoni e bronchi, la sua attività, per identificare la diversa formazione fibroso e cristallina, hanno anche importante valore diagnostico, e infine approssimativamente valutare la condizione flora microbica delle vie respiratorie (batterioscopia).

A una microscopia usano preparazioni natali e dipinte di un espettorato. Per studiare la flora microbica (batterioscopia), gli strisci di espettorato sono solitamente colorati da Romanovsky-Giemsa, secondo Gram, e per la rilevazione di Mycobacterium tuberculosis, ma Cilu-Nielsen.

Elementi cellulari e fibre elastiche

Degli elementi cellulari che possono essere rilevati nell'espettorato di pazienti con polmonite, cellule epiteliali, macrofagi alveolari, leucociti ed eritrociti sono di importanza diagnostica.

Cellule epiteliali. Epitelio squamoso non ha dalla bocca, nasofaringe, le corde vocali e il valore diagnostico epiglottide, anche se il rilevamento di un gran numero di cellule squamose, tipicamente indica un campione a bassa qualità espettorato consegnati al laboratorio e saliva contenente sostanziale impurezza.

Nei pazienti con polmonite, l'espettorato è considerato adatto per l'indagine se, con una microscopia con un piccolo aumento, il numero di cellule epiteliali non superi 10 nel campo visivo. Un numero maggiore di cellule epiteliali indica una predominanza inaccettabile di contenuto orofaringeo nel campione biologico.

Macrofagi alveolari, che in piccole quantità possono anche essere trovati in qualsiasi espettorato, sono grandi cellule di origine reticolofisticale con un nucleo grande eccentricamente situato e inclusioni abbondanti nel citoplasma. Queste inclusioni possono essere costituite da macrofagi assorbiti dalle più piccole particelle di polvere (cellule di polvere), leucociti e simili. Il numero di macrofagi alveolari aumenta con i processi infiammatori nel parenchima polmonare e nelle vie aeree, compresa la polmonite.

Cellule di epitelio cilindrico ciliato che rivestono la mucosa della laringe, della trachea e dei bronchi. Sembrano cellule allungate, allargate a un'estremità, dove si trovano il nucleo e le ciglia. Cellule cilindrico epitelio ciliato trovato in qualsiasi espettorato, ma il loro aumento indica danno della mucosa bronchiale e trachea (acuta e cronica bronchite, bronchiectasie, tracheiti, laringiti).

I leucociti in piccole quantità (2-5 nel campo visivo) si trovano in qualsiasi espettorato. Quando l'infiammazione del tessuto polmonare o della mucosa bronchiale e della trachea, specialmente quando suppurazione (gangrena, ascesso polmonare, bronchiectasie), il loro numero è significativamente aumentato.

Quando si colorano le preparazioni di espettorato secondo Romanovsky-Giemsa, è possibile differenziare i singoli leucociti, che a volte hanno un importante valore diagnostico. Pertanto, con una pronunciata infiammazione del tessuto polmonare o della mucosa bronchiale, aumentano sia il numero totale di leucociti neutrofili sia il numero delle loro forme degenerative con frammentazione dei nuclei e distruzione del citoplasma.

Un aumento del numero di forme degenerative dei leucociti è il segno più importante dell'attività del processo infiammatorio e del decorso più grave della malattia.

Eritrociti. Singoli eritrociti possono essere rilevati praticamente e qualsiasi espettorato. Un significativo aumento si osserva quando la permeabilità vascolare è compromessa in pazienti con polmonite, con distruzione di polmone o tessuto bronchiale, ristagno in un piccolo circolo di circolazione, infarto polmonare, ecc. In un gran numero di globuli rossi nell'espettorato si trovano durante l'emottisi di qualsiasi genesi.

fibre elastiche. Un altro elemento delle fibre di plastica dell'espettorato che appaiono nell'espettorato quando si deve menzionare la distruzione del tessuto polmonare (ascesso polmonare, tubercolosi, cancro polmonare disintegrante, ecc.). Le fibre elastiche sono presentate nell'espettorato sotto forma di sottili filamenti a due contorni, crimpati con divisione dicotomica alle estremità. La comparsa di fibre elastiche nell'espettorato in pazienti con polmonite grave indica il verificarsi di una delle complicanze della malattia - l'ascesso del tessuto polmonare. In alcuni casi, nella formazione di ascessi polmonari, le fibre elastiche nell'espettorato possono essere rilevate anche leggermente prima rispetto ai corrispondenti cambiamenti radiografici.

Spesso, con polmonite cronica, tubercolosi, actinomicosi, bronchite fibrinosa nelle preparazioni di espettorato, possono essere rilevate fibre sottili di fibrina.

I segni di un processo infiammatorio attivo nei polmoni sono:

1. la natura dell'espettorato (mucopurulento o purulento);
2. un aumento del numero di neutrofili nell'espettorato, comprese le loro forme degenerative;
3. un aumento del numero di macrofagi alveolari (da singoli ammassi di diverse cellule nel campo visivo e altro);

L'aspetto nell'espettorato di fibre elastiche indica la distruzione del tessuto polmonare e la formazione di ascessi polmonari.

Le conclusioni finali sulla presenza e il grado di attività dell'infiammazione e della distruzione del tessuto polmonare si formano solo quando vengono confrontati con il quadro clinico della malattia e i risultati di altri metodi di indagine strumentali e di laboratorio.

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Flora microbica

La microscopia a smear, macchiata secondo Gram, e lo studio della flora microbica (bacterioscopy) in una parte di pazienti con polmonite, permettono di stabilire provvisoriamente l'agente causale più probabile di infezione polmonare. Questo semplice metodo di diagnostica espressa del patogeno non è sufficientemente accurato e dovrebbe essere usato solo in combinazione con altri metodi (microbiologici, immunologici) di esame dell'espettorato. La microscopia a immersione di strisci colorati è talvolta molto utile per la selezione di emergenza e la somministrazione di un'adeguata terapia antibiotica. Tuttavia, si dovrebbe tenere presente la possibilità di contaminazione del contenuto bronchiale della microflora del tratto respiratorio superiore e della cavità orale, specialmente quando la raccolta dell'espettorato non è corretta.

Pertanto, l'espettorato è considerato adatto per ulteriori indagini (bacterioscopy e esame microbiologico) solo se soddisfa le seguenti condizioni:

• La colorazione di Gram nell'espettorato rivela un gran numero di neutrofili (più di 25 nel campo visivo con un piccolo ingrandimento del microscopio);
• Il numero di cellule epiteliali, più caratteristiche del contenuto dell'orofaringe, non supera 10;
• nella preparazione c'è una predominanza di microrganismi dello stesso tipo morfologico.

Su colorazione di Gram di espettorato in uno striscio a volte essere sufficiente per identificare i pneumococchi grammo, streptococchi, stafilococchi e di gruppo di batteri gram-negativi buona -. Klebsiellu, bacchetta Pfeiffer, E. Coli e altri batteri gram-positivi in questo caso diventano blu, e Gram - rosso.

Agenti patogeni batterici della polmonite

Gram-positivi	Grammo
Pneumococco Streptococcus pneumoniae. Streptokokki Streptococcus pyogenes, Streptococcus viridans. Stafilokokki: Staphylococcus aureus, Staphylococcus haemolyticus.	Klebsiellы  (Klebsiella pneumoniae) Hemophilus influenzae (Pfeiffer) Haemophilius influenzae Pseudomonas aeruginosa  (Pseudomonas aeruginosa) Legionella (Legionella pneumofilia) E. Coli (Escherichia coli)

Pre espettorato striscio è il modo più semplice di polmonite verifica patogeno e ha un valore definito per la selezione della terapia antibiotica ottimale. Ad esempio, quando si rileva strisci colorati con Gram, diplococchi grompolozhitelnyh (pneumococchi) o stafilococchi invece di antibiotici ad ampio spettro, che aumentano il rischio di selezione e propagazione di microrganismi aitibiotikorezistentnyh possibile assegnare la terapia mirata, attiva contro stafilococchi, o pneumococchi. In altri casi, il rilevamento della flora dominanti nei strisci Gram può indicare pas che provoca la polmonite Enterobacteriaceae sono gram-negativi (Klebsiella, E. Coli, ecc), che richiede una terapia mirata destinazione corrispondente.

Tuttavia, la conclusione provvisoria dell'agente eziologico probabile di infezione polmonare mediante microscopia può essere fatto pas basate solo aumento significativo dei batteri nell'espettorato, in una concentrazione di 10 ⁶ - 10 ⁷  cellule microbiche / ml o più (LL Vishnjakova). Le basse concentrazioni di microrganismi (<10 ³  m.ks / ml) sono caratteristiche della microflora di accompagnamento. Se la concentrazione di corpi microbici varia da 10 ⁴  a 10 ⁶  m.ks / ml, ciò non esclude il ruolo etiologico di questo microrganismo nella comparsa di infezione polmonare, ma non lo dimostra.

Va anche ricordato che i patogeni intratellulari "atipici" (micoplasma,  legionella, clamidia, rickettsia) non macchiano Gramm. In questi casi, il sospetto di avere un'infezione "atipica" può verificarsi se gli strisci mostrano una dissociazione tra un gran numero di neutrofili e un numero estremamente piccolo di cellule microbiche.

Sfortunatamente, il metodo della batterioscopia è generalmente piuttosto basso in sensibilità e specificità. Il valore non predittivo, anche per i pneumococchi ben visualizzati, raggiunge a malapena il 50%. Ciò significa che in metà dei casi il metodo fornisce risultati falsi positivi. Ciò è dovuto a diversi motivi, uno dei quali è il fatto che circa 1/3 dei pazienti prima del ricovero hanno ricevuto antibiotici, riducendo notevolmente l'efficacia di espettorato striscio. Inoltre, anche nel caso di risultati positivi dello studio, indicando una concentrazione sufficientemente elevata nel striscio "tipici" batteri patogeni (ad esempio pneumococcica), non può escludere completamente la presenza di co-infezione "atipico" patogeni intracellulari (micoplasma, clamidia, Legionella).

Il metodo di batterioscopia degli strisci di espettorato, macchiato da Gram, in alcuni casi aiuta a verificare l'agente causale della polmonite, sebbene generalmente abbia un valore predittivo molto basso. I patogeni atipici intracellulari (micoplasma, legionella, clamidia, rickettsia) non sono affatto verificati con il metodo della batterioscopia, poiché non macchiano Gramm.

Va menzionata la possibilità di una diagnosi microscopica in pazienti con polmonite da infezione polmonare fungina. Il più rilevante per i pazienti ricevono un trattamento prolungato con antibiotici ad ampio spettro, è il rilevamento di nativo o microscopia di espettorato tinto Candida albicans in forma di cellule di lievito e la ramificazione del micelio. Indicano un cambiamento nella microflora del contenuto tracheobronchiale, che si verifica sotto l'influenza del trattamento antibiotico, che richiede una sostanziale correzione della terapia.

In alcuni casi in pazienti con polmonite, è necessario differenziare la malattia polmonare esistente con la tubercolosi. A tale scopo viene utilizzato il colore dell'espettorato dell'espettorato secondo Tsiol-Nielsen, che in alcuni casi consente di identificare il micobatterio tubercolare, sebbene il risultato negativo di tale studio non significhi che il paziente non ha la tubercolosi. Quando si macchia l'espettorato secondo Tsil-Nielsen, il mycobacterium tuberculosis è colorato in rosso e tutti gli altri elementi dell'espettorato sono blu. I micobatteri tubercolari hanno l'aspetto di feci, bastoncini dritti o leggermente curvi di diverse lunghezze con addensamenti separati. Si trovano nella preparazione in gruppi o singolarmente. Il valore diagnostico è il rilevamento nella preparazione di anche singoli tubercolosi da micobatteri.

Per aumentare l'efficacia della rilevazione microscopica della tubercolosi dei micobatteri, utilizzare una serie di metodi aggiuntivi. Il più comune di questi è il cosiddetto metodo di flottazione, in cui l'espettorato omogeneizzato viene scosso con toluene, xilene o benzina, le cui goccioline compaiono e catturano i micobatteri. Dopo aver regolato l'espettorato, lo strato superiore viene pipettato sul vetrino. Quindi il farmaco è fissato e colorato da Tsilyu-Nielsen. Esistono altri metodi di accumulo (elettroforesi) e microscopia di batteri tubercolari (microscopia a luminescenza).

L'esame microscopico (analisi) dell'espettorato può rilevare muco, elementi cellulari, formazioni fibrose e cristalline, funghi, batteri e parassiti.

cellule

• I macrofagi alveolari sono cellule di origine reticologistocitica. Un gran numero di macrofagi nell'espettorato viene rilevato nei processi cronici e nella fase di risoluzione dei processi acuti nel sistema broncopolmonare. I macrofagi alveolari contenenti emosiderina ("cellule di difetti cardiaci") sono rilevati con infarto lieve, emorragia, ristagno in un piccolo circolo di circolazione. I macrofagi con goccioline lipidiche sono un segno del processo ostruttivo nei bronchi e nei bronchioli.
• Le cellule xantom (macrofagi grassi) si trovano in ascesso, actinomicosi, echinococcosi dei polmoni.
• Le cellule dell'epitelio cilindrico ciliato sono cellule della membrana mucosa della laringe, della trachea e dei bronchi; si trovano in bronchiti, tracheiti, asma bronchiale, neoplasie maligne dei polmoni.
• L'epitelio piatto viene rilevato quando lo sputo entra nell'espettorato, non ha significato diagnostico.
• I leucociti in una o l'altra quantità sono presenti in qualsiasi espettorato. Un gran numero di neutrofili sono rilevati nell'espettorato mucopurulento e purulento. Gli eosinofili sono ricchi di espettorato nell'asma bronchiale, polmonite eosinofila, lesioni polmonari glottide e infarto polmonare. Gli eosinofili possono comparire nell'espettorato per la tubercolosi e il cancro ai polmoni. I linfociti in gran numero si trovano nella pertosse e, più raramente, nella tubercolosi.
• Eritrociti. La rilevazione di singoli globuli rossi nell'espettorato non ha significato diagnostico. Se nell'espettorato è presente sangue fresco, vengono determinati gli eritrociti immodificati, ma se il sangue che è rimasto a lungo nel tratto respiratorio lascia con espettorato, vengono trovati globuli rossi lisciviati.
• Le cellule di tumori maligni si trovano in neoplasie maligne.

fibre

• Le fibre elastiche appaiono nel decadimento del tessuto polmonare, che è accompagnato dalla distruzione dello strato epiteliale e dal rilascio di fibre elastiche; si trovano in tubercolosi, ascesso, echinococcosi, neoplasie polmonari.
• Le fibre coronali sono rilevate nelle malattie polmonari croniche, come la tubercolosi cavernosa.
• Le fibre elastiche calcinate sono fibre elastiche impregnate di sali di calcio. Il loro rilevamento nell'espettorato è caratteristico per la rottura della petrichite tubercolare.

Spirali, cristalli

• Le spirali di Kurshman si formano nello stato spastico dei bronchi e la presenza di muco in esse. Durante un colpo di tosse, il muco viscoso viene rilasciato nel lume di un bronco più grande, ruotando a spirale. Le spirali di Kurshman appaiono con asma bronchiale, bronchite, tumore polmonare, compressione dei bronchi.
• I cristalli di Charcot-Leiden sono il prodotto del decadimento degli eosinofili. Di solito compaiono in un espettorato contenente eosinofili; sono caratteristici per asma bronchiale, condizioni allergiche, infiltrati eosinofilici nei polmoni, raffreddore polmonare.
• I cristalli di colesterolo appaiono con ascesso, echinococcosi polmonare, neoplasie polmonari.
• I cristalli di ematoidina sono caratteristici per ascesso e gangrena dei polmoni.
• Drusi di actinomiceti sono rilevati nell'actinomicosi dei polmoni.
• Elementi di echinococco appaiono con echinococcosi dei polmoni.
• Dietrich di sughero - grumi di un colore grigio-giallastro, con un odore sgradevole. Consistono di detriti, batteri, acidi grassi, goccioline di grasso. Sono tipici per un ascesso di polmone e bronchiectasie.
• La tetradina di Ehrlich è composta da quattro elementi: detriti calcificati, fibre elastiche calcificate, cristalli di colesterolo e tubercolosi del micobatterio. Appare nel decadimento del fuoco tubercolare primario calcificato.

Il micelio e le cellule fungine in erba compaiono nelle lesioni fungine del sistema broncopolmonare.

La pneumocisti si verifica con polmonite da pneumocisti.

Sfere di funghi sono rilevate nella coccidioidomicosi dei polmoni.

Le larve di ascaridi vengono rilevate con ascariasis.

Le larve dell'ugristico intestinale sono identificate con strongyloidiasis.

Le uova del colpo di fortuna polmonare sono identificate con paragonimosi.

Elementi trovati nell'espettorato nell'asma bronchiale. Quando l'asma bronchiale è solitamente separato da una piccola quantità di espettorato viscoso mucoso. Macroscopicamente puoi vedere la spirale di Kurshman. Quando la ricerca microscopica è caratteristica della presenza di eosinofili, l'epitelio cilindrico, ci sono cristalli di Charcot-Leiden.