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Microscopia confocale intraorale della cornea
Ultima recensione: 23.04.2024
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La microscopia confocale della cornea è uno dei moderni metodi di indagine; permette di condurre il monitoraggio intravitale dello stato della cornea con visualizzazione dei tessuti a livello cellulare e microstrutturale.
Questo metodo, grazie al design originale del microscopio e alla sua alta risoluzione, consente di visualizzare i tessuti viventi della cornea, misurare lo spessore di ciascuno dei suoi strati e valutare il grado di disturbo morfologico.
Lo scopo della microscopia confocale della cornea
Caratterizzare i cambiamenti morfologici nella cornea, derivanti da varie malattie infiammatorie e distrofiche, nonché da interventi chirurgici e gli effetti di CR.
I dati morfologici sono necessari per valutare la gravità del processo patologico, l'efficacia del trattamento e determinare le tattiche di gestione del paziente.
Indicazioni per la procedura
- Malattie infiammatorie della cornea ( cheratite ).
- Malattie distrofiche della cornea ( cheratocono, distrofia di Fuchs, ecc.).
- Sindrome di "occhio secco".
- Condizioni dopo interventi chirurgici sulla cornea (attraverso trapianto di cornea, operazioni chererifere).
- Condizioni associate all'uso delle lenti a contatto.
[Tecnica microscopia confocale della cornea
Lo studio viene eseguito su un microscopio confocale ConfoScan 4 (Nider) con un incremento di 500 volte. Il dispositivo consente di esaminare la cornea su tutto il suo spessore.
La dimensione della zona investigata è 440 × 330 μm, lo spessore dello strato di scansione è 5 μm. Una lente con una goccia di gel viene portata nella cornea per toccare e impostare in modo che lo spessore dello strato liquido di immersione sia di 2 mm. Il design del dispositivo consente di esaminare la cornea nella zona centrale e nelle sue aree paracentrali.
Prestazione normale
Normale immagine morfologica della cornea
L'epitelio anteriore consiste di 5-6 strati di cellule. Lo spessore medio di tutto l'epitelio è di circa 50 μm. Secondo la struttura morfologica, si distinguono i seguenti strati (dall'interno verso l'esterno): basale, subulato e superficiale.
- Lo strato più interno (basale) è rappresentato da piccole cellule cilindriche dense senza nucleo visibile. I bordi delle cellule basali sono chiari, luminosi.
- Lo strato intermedio consiste di 2-3 strati di cellule a forma di spina dorsale (alate) con invaginazioni profonde, in cui sono costruite le escrescenze delle cellule vicine. Microscopicamente, i confini delle cellule sono abbastanza ben distinguibili, e i nuclei potrebbero non essere definiti o essere confusi.
- Lo strato superficiale dell'epitelio è rappresentato da uno o due strati di cellule poligonali con limiti chiari e densità omogenea. I nuclei sono solitamente più luminosi del citoplasma, in cui si può anche distinguere un anello scuro vicino al nucleo.
Tra le cellule dello strato superficiale si distingue tra buio e luce. L'aumentata riflettività delle cellule epiteliali indica una diminuzione del livello di metabolismo in esse e l'inizio della loro desquamazione.
La membrana Bowman è una struttura trasparente che non riflette la luce, quindi è impossibile visualizzarla quando viene eseguita la microscopia confocale.
Il plesso nervoso subbasico si trova sotto la membrana di Bowman. Normalmente, le fibre nervose sembrano strisce luminose che corrono parallele su uno sfondo scuro, in contatto tra loro. La riflettività (riflettività) può essere irregolare nella lunghezza della fibra.
Lo stroma della cornea occupa dall'80 al 90% dello spessore della cornea e consiste in una componente cellulare ed extracellulare. Gli elementi cellulari di base dello stroma sono cheratociti; costituiscono circa il 5% del volume.
Un modello microscopico tipico dello stroma comprende diversi corpi luminosi di forma ovale irregolare (nuclei di cheratociti) che si trovano nello spessore di una matrice trasparente di colore grigio scuro o nero. Normalmente, la visualizzazione di strutture extracellulari è impossibile a causa della loro trasparenza. Lo stroma può essere suddiviso condizionatamente in sottostrati: anteriore (situato direttamente sotto la membrana Bowman e costituisce il 10% dello spessore dello stroma), anteriore, medio e posteriore.
La densità media dei cheratociti è maggiore nello stroma anteriore, gradualmente il loro numero diminuisce verso gli strati posteriori. La densità delle cellule dello stroma anteriore è quasi il doppio di quella delle cellule dello stroma posteriore (se la densità delle cellule dello stroma anteriore è del 100%, la densità delle cellule dello stroma posteriore è di circa il 53,7%). Nello stroma anteriore, i nuclei dei cheratociti hanno una forma rotonda a forma di fagiolo, e nell'ovale posteriore e più allungati.
I nuclei dei cheratociti possono differire in luminosità. La diversa capacità di riflettere la luce dipende dal loro stato metabolico. Le cellule più luminose sono considerate cheratociti attivati ("cellule dello stress"), le cui attività sono finalizzate a mantenere l'omeostasi corneale interna. Nella norma e nel campo visivo, ci sono singole celle attivate.
Le fibre nervose nello stroma anteriore della cornea sono visualizzate come bande luminose omogenee, formando spesso biforcazioni.
La membrana descemet è normalmente trasparente e non è visualizzata mediante microscopia confocale.
L'epitelio posteriore è un monostrato di cellule piatte esagonali o poligonali con una superficie uniformemente chiara su uno sfondo di distinti confini intercellulari scuri.
Il dispositivo offre la possibilità di calcolare manualmente o automaticamente la densità delle celle, la loro area e il coefficiente di variabilità.
Cambiamenti patologici nella struttura della cornea
Il cheratocono è caratterizzato da cambiamenti significativi nell'epitelio anteriore e nello stroma della cornea.