Proteina Bence-Jones

L'urina di una persona sana non contiene la proteina di Bence-Jones, rappresentata da catene leggere di immunoglobuline che vengono rilevate a seguito della formazione di processi tumorali maligni.

Gli esami di laboratorio per la presenza di specifiche proteine a basso peso molecolare sono necessari per diagnosticare numerose condizioni patologiche (il più delle volte problemi del sistema immunitario β), nonché per determinare l'efficacia della terapia utilizzata.

In eccesso, la proteina di Bence-Jones viene prodotta dalle plasmacellule, si muove nel flusso sanguigno e viene escreta attraverso la minzione. È quest'ultima proprietà dei corpi proteici che permette di sospettare le seguenti patologie durante l'esame delle urine:

• mieloma;
• osteosarcoma;
• plasmocitoma;
• leucemia linfatica cronica;
• linfogranulomatosi;
• amiloidosi primaria;
• macroglobulinemia;
• gammopatia monoclonale idiapatica.

È stata confermata clinicamente la correlazione tra il rilascio di una specifica proteina e la successiva disfunzione renale causata dall'effetto tossico dei corpi proteici sulle strutture epiteliali dei tubuli renali, che a sua volta provoca il fenomeno della distrofia, della sindrome di Fanconi e dell'amiloidosi renale.

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Proteina di Bence Jones nelle urine

La presenza di proteine nelle urine è chiamata proteinuria. La proteinuria prerenale è intesa come la presenza di un'enorme quantità di proteine a basso peso molecolare nelle urine. In questo caso, non vi è alcun danno al filtro renale e ai tubuli, e la normale funzionalità renale non è in grado di garantire il riassorbimento dei corpi proteici. La proteinuria extrarenale (falsa), ovvero che si verifica senza compromissione della funzionalità renale, indica la presenza di un processo infettivo o maligno nell'organismo. La proteinuria si osserva nel 60-90% dei casi di pazienti con mieloma. Circa il 20% delle condizioni patologiche è rappresentato dal mieloma di Bence-Jones.

La proteina di Bence-Jones nelle urine viene differenziata a causa di alterazioni umorali nel sistema immunitario β. La comparsa di corpi proteici è associata a mieloma, emoblastosi paraproteinemica, endoteliosi, macroglobulinemia di Waldenström, leucemia linfatica e osteosarcomi. Il rilevamento della proteina di Bence-Jones nelle urine è un importante passo diagnostico e prognostico. A causa del suo basso peso molecolare, la proteina di Bence-Jones viene escreta nelle urine, danneggiando l'epitelio dei tubuli renali, con conseguente rischio di insufficienza renale, che può portare alla morte. È inoltre importante una tempestiva classificazione della proteina in base al tipo: la proteina λ ha un effetto nefrotossico maggiore rispetto alla κ.

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Saggio proteico di Bence Jones

La presenza di corpi proteici diversi dal siero nelle urine indica leucemia linfatica, osteosarcoma o mieloma (processi tumorali del midollo osseo). La proteina di Bence-Jones, quando il filtrato urinario viene riscaldato a 45-60 °C, precipita sotto forma di sedimento torbido che si deposita sulle pareti della provetta. Un ulteriore aumento della temperatura fino all'ebollizione dissolve la torbidità separata.

Il test quantitativo per la proteina di Bence Jones viene eseguito come segue:

• utilizzando come reagente parte acqua e parte acido nitrico;
• mettere acido nitrico (0,5-1 ml) in una provetta con strati dello stesso livello di urina da testare;
• valutazione del risultato dopo 2 minuti (la comparsa di un sottile anello al confine del mezzo liquido indica la presenza dello 0,033% di corpi proteici).

L'osservazione di un anello filiforme richiede la diluizione dell'urina con acqua in rapporto 1:1; la comparsa di un anello spesso indica la necessità di mescolare parte dell'urina con tre parti di acqua; nel caso di un anello compatto, una parte dell'urina viene diluita con sette parti di acqua. Inoltre, la diluizione continua fino alla comparsa del sedimento caratteristico entro 2-3 minuti dall'inizio del test.

La quantità di proteine contenute si calcola moltiplicando lo 0,033% per il valore di diluizione. Ad esempio, se l'urina è stata diluita 10 volte, l'anello di corpi proteici è apparso alla fine del terzo minuto di studio, quindi la percentuale di proteine incluse si calcola come segue: 0,033 x 10 = 0,33.

In assenza di sedimenti, si valuta il grado di torbidità: tracce di torbidità pronunciate, deboli o appena distinguibili.

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Secrezione proteica di Bence Jones

A seconda del tipo di immunoglobulina secreta si distingue tra:

• patologie delle catene leggere (secrezione della proteina di Bence Jones);
• glomerulopatia (secrezione di altre immunoglobuline).

Sono possibili anche diverse combinazioni di danno renale. Come dimostra la pratica clinica, la nefropatia è una conseguenza di patologie linfoproliferative (mieloma multiplo, leucemia linfatica cronica, malattia di Waldenström, ecc.).

Una volta rilasciate nel flusso sanguigno, come tutte le proteine con un peso molecolare fino a 40 kDa, le catene leggere bypassano il filtro renale, quindi si scompongono in oligopeptidi e amminoacidi attraverso i lisosomi. Un eccesso di catene leggere provoca una disfunzione della reazione catabolica e il possibile rilascio di enzimi lisosomiali, con conseguente necrosi del tessuto tubulare. I corpi proteici determinano l'impossibilità di riassorbimento e, quando le catene leggere monoclonali si combinano con la proteina di Tamm-Horsfall, si formano cilindri proteici nei tubuli distali.

Proteina di Bence Jones nella malattia del mieloma

Il mieloma multiplo è una condizione patologica in cui l'organismo produce catene di immunoglobuline leggere invece di quelle complete. La diagnosi e il monitoraggio della malattia si effettuano tramite esami di laboratorio delle urine, che mostrano il contenuto quantitativo di proteine. La specificazione del sottotipo di mieloma si basa sull'analisi del siero sanguigno. I segni clinici della malattia includono: sindrome da dolore osseo, disfunzione minzionale, ematomi di origine sconosciuta, ritenzione idrica.

La proteina di Bence Jones nel mieloma viene rilevata tramite test standard che mostrano il contenuto quantitativo di corpi proteici e valutano il grado di danno renale. L'identificazione della proteina nelle urine spiega il danno all'epitelio con sclerosi dello stroma renale, che nel tempo porta all'insufficienza renale, una causa comune di morte a causa del danno da mieloma (la proteina di Bence Jones ostruisce completamente i tubuli, impedendo la minzione).

I dati statistici indicano che il mieloma si differenzia negli uomini di età superiore ai 60 anni, con una storia di predisposizione genetica, che soffrono di obesità e immunodepressione e che sono stati esposti a sostanze tossiche e radioattive.

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Determinazione della proteina di Bence Jones

Per differenziare una proteina specifica, viene eseguito un esame di laboratorio della porzione media di urina del mattino (è richiesto un volume di almeno 50 ml). La presenza di proteina di Bence-Jones con determinazione della componente quantitativa è possibile mediante il metodo dell'immunofissazione. La separazione delle proteine avviene mediante elettroforesi con successiva immunofissazione utilizzando sieri speciali. Legando la proteina con anticorpi delle catene leggere e pesanti delle immunoglobuline, si formano immunocomplessi, che vengono valutati mediante colorazione.

È importante notare che anche la minima concentrazione di proteine viene rilevata a causa della reazione di precipitazione con acido solfosalicilico. La proteina di Bence-Jones viene determinata combinando urina filtrata (4 ml) con tampone acetato (1 ml). Il successivo riscaldamento a 60 °C in un bagno d'acqua e il mantenimento per 15 minuti con un campione positivo producono un sedimento caratteristico. Questo metodo è considerato il più affidabile. Un ambiente eccessivamente acido o alcalino e una bassa densità relativa delle urine possono influenzare negativamente i risultati dell'analisi.

I metodi di ricerca in cui la proteina di Bence-Jones viene disciolta riscaldando a 100 °C o precipitata nuovamente raffreddandola sono inaffidabili, poiché non tutti gli elementi proteici presentano le caratteristiche corrispondenti. Tuttavia, l'uso di cartine indicatrici è del tutto inadatto per la rilevazione della proteina di Bence-Jones.

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